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标题:【求助】质谱的前处理技术有哪些？

chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】质谱的前处理技术有哪些？


随着蛋白质组学的发展，质谱技术越来越广泛应用。但是在前处理方面，大家都有什么经验？最好是针对不同厂家的产品的不同前处理技术
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

比如说二维电泳和二维液相，这两种技术比较常规。目前也有几家公司推出磁珠分离，然后直接点样，大家比较这些技术的优点和不足，想和各位多作交流，望大家畅所欲言！谢谢
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

除盐富集是王道
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感谢楼上的答复！
如果采用的是基质辅助激光解析电离，受盐离子的影响大吗？
现在invitrogen公司推出了磁珠分离技术，处理之后就可以电靶上maldi你觉得这种技术可以代替二维电泳和二维液相吗？
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相比较而言，基质辅助激光解析电离对盐的忍耐程度算是比较大的了，不过盐浓度太高也会有所影响的。个人觉得每种技术都有其特点和优点，最好还是根据具体实验来决定采用哪种方法
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感谢楼上的回复！如果样本是血清，血浆，尿液呢？用磁珠分离可以点靶上质谱么？
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ffaa[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我没做过磁珠分离的方法，你可以自己先做个预实验，如果不行再改用其他方法
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pengke1983[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

采用MALDI TOF，若是除盐不好的话很难出峰，而且基质容易发黑
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感谢各位老师的经验分享！我现在做了几份血清样本，又遇到了高丰度蛋白（比如白蛋白）的问题，高丰度蛋白怎么样去除呢？望各位老师指点迷津，谢谢！
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2014-4-1 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有就是我如果用50%的乙腈洗脱蛋白，会不会引起蛋白变性？
还有我在用梯度的nacl或者调节蛋白的pH值来洗脱蛋白，会不会引起变性？
等待您的回复，谢谢！
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