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标题:【求助】WB一抗到底应该怎么回收？

sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-4-10 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】WB一抗到底应该怎么回收？


我上一次用TBST+奶粉（5%）稀释一抗。用毕，回收置于4度冰箱保存。中间隔了2天，今天我用拿出来用（稍微补了一些新鲜的），摇过夜后第2天发现，膜上沾满了奶粉的凝块。而用新配的奶粉5%稀释一抗就不会这样。
请问该怎样避免这种情况？我的一抗很宝贵啊，不回收也不行啊！
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ero11[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用TBS+BSA（1%~3%）稀释一抗，用后回收置于-20度冻存。再用时解冻适量补充新鲜的就行。
多多交流！
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sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

TBST可以吗
谢谢
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wmp1234[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室都是用TBST稀释一抗的
加不加奶粉视抗体的强度而定
但一般都是加1%的奶粉
回收次数也是视 抗体而异
有的可以用5-6次呢
我自己都是新配的时候适量多配点
一直用到不能用为止
因为我觉得老是补充新鲜抗体挺浪费的
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sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是加了奶粉的一抗在摇过夜的时候，奶粉都凝结成块了，昨天晚上又发生这种请情况了。我打算换成BSA，可能会好一点
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大概奶粉质量不满意吧.
我们都是0.5%奶粉T-TBS配置的，加叠氮钠防腐，短期内没有问题
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huifeng0516[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
放在-20度冰箱能用很久，牛奶也不会坏
BSA比牛奶好，更不容易坏
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remenb[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果二抗是HRP标记的，用叠氮钠防腐就不合适。我们平时用的都是伊利的高钙脱脂奶粉，在4度冰箱中放24小时从来没有出现过凝结成块，所以你还是考虑奶粉质量问题。用BSA肯定好，但是成本太高，还是脱脂奶粉好用，经济又有效。
我们还从未回收抗体，所以其他地不清楚，不过看了上面的还是很有帮助，哪天经费不充足了就可以考虑回收再利用了。还是要谢谢。
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发表于 2014-4-10 14:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
就染色结果看，个人认为脱脂奶粉的效果比较好，可是用奶粉稀释的话，不能长时保存，奶粉会干掉，夏天的话，超过三天还会发臭，所以如果在三天之内每天重复做，问题不是很大，如果需要一周，中间有一两天间隔，建议还是用1.5%BSA加叠氮钠
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xue258[使用道具]
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发表于 2014-4-10 14:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用加了5％脱脂奶的TBST稀释抗体能用两天，4度冰箱保存～
没回收过～
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