【求助】蛋白纯化

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标题:【求助】蛋白纯化

finger[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位，我的蛋白带有his标签，
现在准备纯化，我想知道大家用的什么公司的产品，那个效果好点，而且价格不是太高，谢谢。

fei1226com[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用的Qigen的胶，买了10来ml把，1-2千快，用的很好。
然后G-25脱盐，用的AKTA FPLC和GE的预装G-25小柱子。很方便
浓缩用millpore的超滤管，80/tube，可以用几次。

gogo[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

艾基生物公司(EliGene Corporation)的也不错的!!性价比不错!

caihong[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

自己做纯化不多的话还不如找专门做蛋白的人做一下省钱省事。

zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室以前都没有做过,刚开始学者做

ending[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 zsxan1990 于 2014-4-12 10:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们实验室以前都没有做过,刚开始学者做

简单的很，唯手熟而

IAM007[使用道具]
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发表于 2014-4-12 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

HIS 标签的纯化相对容易些
可以选用Pharmacia或者Novagen的Ni离子亲和柱
两者的区别在于前者的重复性好些，第一次用需要自己挂Ni
后者的亲和力强些，买来可以直接使用
一般过了Ni柱，目的蛋白就已经占主要分量了
然后再用HPLC中的离子交换，分子筛都可以
当然也要摸索条件，条件成熟以后，这个流程下来，目的蛋白基本就可以纯到可以拿去结晶的程度了