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标题:[未解决]【求助】脂质体制备疑惑

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
a456[使用道具]
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【求助】脂质体制备疑惑

请教一下,制备空白脂质体,没有旋转蒸发仪可以制备出吗?
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ay123[使用道具]
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可以采用乙醇注入、喷雾干燥、冷冻干燥等制备空白脂质体

乙醇注入法:将磷脂溶于无水乙醇,控制乙醇溶液和水溶液温度均保持在磷脂相转变温度以上,将乙醇溶液分散在水溶液中,形成脂质体悬液,经高压均质等整粒处理后超滤除去乙醇,得到空白脂质体悬液;

喷雾干燥:将磷脂溶于乙醇或二氯甲烷或其他有机溶媒中,喷雾干燥得到磷脂粉末,将磷脂粉末分散到水溶液中,在相转变温度以上完成水化,得到脂质体悬液,经高压均质等整粒处理,得到空白脂质体;

冷冻干燥:将磷脂溶于叔丁醇,冷冻干燥得到磷脂粉末,后续处理同上。

注意,喷雾干燥或冷冻干燥仅适合相转变温度较高的磷脂,而乙醇注入则可以适合各种相转变温度的磷脂。



冷冻干燥还可以是这样的:将磷脂溶于叔丁醇,与适量的水形成均相,冷冻干燥除去叔丁醇和水,得到冻干脂质体,重新水化,整粒后得到空白脂质体。这种方法一般仅适合低相转变温度的磷脂。
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谢谢你的回答,不过,我是病原的,实验室做药的条件太简陋,你说的高压均质,似乎用到这个方法的机器也很贵呢,好在我找到跟别人公用的旋转蒸发仪了,不过新的困惑是,我本科不是学药的,对这类实验不太了解,我按照网站上的实验指导制备空白脂质体,操作到经旋转蒸发仪减压蒸馏无水乙醇那一步后,下一步是说加入PBS缓冲液,想问问这一步的意义是什么,因为有同学说不需要缓冲液了,我还想知道减压蒸馏后,烧瓶里的脂质体是要粉末状的吗?我自己得到的结果是烧瓶上是油脂状的药膜,这样的情况怎么继续进行呢??急求解惑!!!
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水化时加入pH7.4的PBS液是为了模拟人体的生理环境,也可直接用蒸馏水。减压蒸馏后烧瓶里的脂质体应是膜状的,该法就叫薄膜分散法
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a456[使用道具]
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但是,我加入的是PH值为5.7左右的,看到书上说脂质体混悬液可以保留10%-20%乙醇呢,那天我就用加了PBS的脂质体悬浊液在油镜下看,结果什么也没有看到啊~~~
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jom[使用道具]
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我是加氯仿溶解做的薄膜分散法,没试过乙醇,旋转蒸发完全除去氯仿,然后真空旋转2-3个小时,再加缓冲液水化,你得到的混悬液有乳光吗?建议你最好先看看与脂质体制备有关的书和文献
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a456[使用道具]
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你说真空旋转的方法也是在旋转蒸发仪上吗?还有你说的乳光是什么意思呢
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