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标题:【分 享】生命科学领域中的成像术

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【分 享】生命科学领域中的成像术


说是成像术,其实就是拍照,从最常规的简单的EB染色,CBB染色,到荧光成像,化学发光,再到最危险的同位素成像等,原理都是差不多,即条带和背景之间信号的差异,只是过程和要求不同而已
从灵敏程度来划分
常规染色 ug-ng级
荧光 ng-pg级
化学发光 pg级
同位素 pg-fg级
做科研过程中,如果没有其他因素的限制,每人都希望检测灵敏度越高越好,这样真实程度也就越高,越不容易出现漏检的情况,能决定科研项目是否有必要进行下去的可能等等,所以我们开始就从同位素成像说起。
放射性同位素的特点
放射性同位素(radioisotope)是不稳定的,它会“变”, 这就是所谓“核衰变”。放射性同位素在进行核衰变的时候,可放射出α射线、 β射线、γ射线和电子俘获等。
核衰变的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受元素所处状态的影响,只和时间有关。放射性同位素衰变的快慢,通常用“半衰期”来表示。半衰期(half-life)即一定数量放射性同位素原子数目减少到其初始值一半时所需要的时间。
常用同位素的特征常数
同位素 符号 半衰期 β射线能量(MeV)
氢-3 3H 12.3年 0.018
碳- 14 14C 5720年 0.156
磷-32 32P 14.3天 1.71
硫-35 35 S 87.1天 0.167
碘-131 131I 8.05天 0.605
放射性强度及其度量单位
1Ci (居里)=3.7×1010dps    
1uCi=每秒钟发生3万7千次衰变
射线与物质的相互作用
1兆电子伏在空气中射程 阻挡物 吸收效果
α射线 1.0厘米 一张普通纸 完全
β射线 10米 有机玻璃板 产生轫致辐射
γ射线 1千米 铅 不能被完全吸收
使底片感光;
使一些物质产生荧光;
可穿透一定厚度的物质,可能使一些物质的分子发生电离;
当射线辐照到人、动物和植物体时,会使生物体发生生理变化
同位素的优点
1、灵敏度高
---放射性示踪法可测到10-14-10-18克水平、Southern blot可达pg以内
2、测量方法简便易行
---X底片曝光、扫磷屏
3、能准确地定量、定位
---射线与物质含量呈线性关系
同位素示踪法基本原理:性质相同,可被跟踪
同位素示踪法特点:灵敏、简便、定量、定位
同位素示踪法在分子生物学中的应用:杂交、酶反应、蛋白DNA结合实验等。
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现在对于同位素成像,很少会用到胶片,而采用磷屏成像。相对于X胶片而言,磷屏具有更高的灵敏度,更宽的线性范围,污染小,可重复使用等优点
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磷屏是一个二维能量存储类型的感应器,在其可被光激发的磷(BaFX:Eu2+)层面上储存电离辐射。当已曝光的磷屏被红光二次激发后,电子进行跃迁,随后返回基态,发出400nm左右的蓝光,发光强度与储存的能量成正比,从而可以进行定量分析


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磷屏可用于同位素检测、X射线检测、中子及其他能量物质的检测


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一般磷屏的结构有三层,保护层(PET)、磷屏层和支持层(铁化合物和PET),而对于3H磷屏只有两层,即磷屏层和支持层,因为3H发射出的能量非常弱,不能穿透保护层,所以3H磷屏没有保护层,这种3H磷屏是一次使用的


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磷屏成像原理


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磷屏的使用过程


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3H磷屏成像


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32P成像


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