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标题:【求助】双氧水脱色和活性炭哪个好啊

popo520[使用道具]
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发表于 2014-4-14 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】双氧水脱色和活性炭哪个好啊

各位高手,最近在做香菇多糖提纯,我想要用双氧水脱色,我用了10克粗糖溶得100ml溶液,我用多少双氧水可以脱色完全呢?具体怎么操作呢?
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-4-14 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个以前做过一点，和楼主讨论一下吧。
首先不建议使用活性炭，因为活性炭对多糖吸附比较明显，会有比较大的损失。至于双氧水，没有用过，不知道会不会对多糖有氧化作用。
建议使用透析的方法，如果有小的超滤装置或样品较多的话，可以选择超滤。同样，凝胶过滤也不错。但有一点请楼主注意，那就是以前我纯化出来的多糖几乎都是有一点颜色的，可能是色素和多糖有聚合物的形式（猜得）。
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发表于 2014-4-14 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
使用活性炭脱色后，进行抽滤可不可以呢?双氧水脱色以后色素虽然被氧化，但还混在溶液中，不好除去。还有就是它的氧化作用，不过文献上主要是这两种方法
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发表于 2014-4-14 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果用凝胶过滤，操作是不是很麻烦呢？请你发一个protocal过来如何？先谢了
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-4-14 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以抽滤，一般文献上也是这样做的，但总糖的损失是不少的，至于目的多糖的损失就看你的目的多糖的性质了。活性炭的吸附是非特异性的，同时存在物理吸附和化学吸附。但是他的吸附都有一个前提，那就是待吸附物的分子大小必须小于所用活性炭的微孔尺寸，即待吸附的分子必须能扩散至活性炭内部。据我所知现在的活性炭生产厂家已经可以在一定范围内确定活性炭微孔的大小了。所以你可以上网搜一搜，看看有没有微孔大小小一些的活性炭，这样可以减少对多糖的吸附的。
至于凝胶过滤，可以找篇文献看看，很多的，我没有现成的方案，现写也不应定严谨，还是看看别人发的文章文比较好。祝你实验顺利。
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发表于 2014-4-14 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢了，我今天把样品冻干了，却不知道如何保存，放在-20的冰箱里（小培皿上盖的保鲜膜），结果白冻了，全湿了，冻干多糖怎么保存好呢
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发表于 2014-4-14 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想先做一个检测，比较这两种脱色方法，现在在考虑实验方案，这个确实不好比较的，没有什么量化的参照指标
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-4-14 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这些问题有的也是我以前所没有解决掉的，期待楼主的成功。冻干多糖可以装入干净的自封袋里，放入干燥器里保存，只要温度低一点的阴凉处，短时间问题都不大，多糖没有想象的那么脆弱。比较脱色效果可以将样品脱色后稀释，测OD600，可以比较个大概。呵呵，粗浅的看法，共同进步。
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发表于 2014-4-14 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

新的球形活性炭，通过特殊工艺制备，其突出特点粒径在0.01到1.5mm可调，孔径范围窄,集中在3nm左右，能特异性的吸附分子量在100到1000的小分子物质, 对分子量越大的物质,吸附力越弱。以胃蛋白酶为例,，两小时的吸附量在10%以下，而一般的药用炭在15分钟就达到90%。十分有希望应用在大分子量的物质与小分子物质的分离。
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