蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】请问复性过程中测OD600有什么含义？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】请问复性过程中测OD600有什么含义？

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
1

发表于 2014-4-16 16:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请问复性过程中测OD600有什么含义？


OD600除了表征菌生长情况外还能表征什么？
看到一片文献，他在研究复性过程的影响因素时，横坐标是影响因素，纵坐标是复性液OD600的值，请问这能表征什么？是什么原理？
望不吝赐教！
在线等！
顶部
831226[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79782
精华 0
积分 770
帖子 1240
信誉分 100
可用分 6976
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态 离线
2

发表于 2014-4-16 16:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细菌数量不同，菌液的光密度值会有所变化，通过OD600值的变化主要是来反映细菌的数量。
OD600为0.5时，每ml菌液中细菌数为100000000个。
顶部
rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
3

发表于 2014-4-16 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在研究复性过程的影响因素时，横坐标是影响因素，纵坐标是复性液OD600的值，请问这能表征什么？是什么原理？
顶部
831226[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79782
精华 0
积分 770
帖子 1240
信誉分 100
可用分 6976
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态 离线
4

发表于 2014-4-16 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是什么复性啊？能不能把文献传上来啊？
顶部
831226[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79782
精华 0
积分 770
帖子 1240
信誉分 100
可用分 6976
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态 离线
5

发表于 2014-4-16 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是此包涵体在600nm处有最大吸收，当OD600值增大时包涵体量比较多，还没有复性。而当OD600值减少，则表明包涵体大部分已经复性。从而通过测定OD600值来判断包涵体的复性情况。但是为什么会是在600nm处有最大吸收峰我也没有搞清楚。
顶部
rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
6

发表于 2014-4-16 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看了看是不是这么回事啊，OD600测定的是复性过程中蛋白析出情况。蛋白析出后就像菌体一样对OD600有吸收了，OD600高说明复性时析出的蛋白沉淀多，蛋白沉淀一般都是复性不成功的蛋白（也有可能是复性成功后聚集的）。作者用这个来衡量复性过程我感觉是不太严谨的，因为没有表明复性结束后的可溶性蛋白是有活性的，即使蛋白析出的少，不代表复性成功的多啊，可溶的都是复性成功的？不见得吧。我觉得应该是复性结束后测活比较有说服力一些。
顶部
rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
7

发表于 2014-4-16 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位战友的解答。
那么请问复性效率要怎么表示比较确切？
有看到文献用相对复性率表示的，是怎么计算的？
还有用非还原性SDS－PAGE表示。
不知有什么好的建议？
顶部
yonger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74174
精华 0
积分 572
帖子 803
信誉分 100
可用分 4861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
8

发表于 2014-4-16 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我感觉这涉及到一个基本概念的问题了，看过一些文献，发现对于复性率的定量似乎都不太准确。什么是包含体？什么是复性呢？这个问题大家都很清楚。那如何衡量复性呢？最准确、
最合理的方法肯定是测活。至于什么SDS-PAGE及液相的方法只能说明结构上的变化，但无法证明这种变化是不是你所期望的，除非有标准品对照。所以我感觉要是想言而有物的话，可以考虑用测活的方法。
顶部