【求助】银染不能染出蛋白点了！

蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】银染不能染出蛋白点了！

12 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】银染不能染出蛋白点了！

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2014-4-18 16:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做双向已经有一段时间了，前段时间做预试验的时候把染色步骤已经做得很明白了，重复性很高。但是现在做正式实验的时候却出现银染不能出结果了。以前含量很高，非常明显的标致点，现在却出不来，后来试了考染，居然能出来。好奇怪！！！！小妹可以保证所有样品，试剂，方法，时间都是一致的，请教各位为什么会出现这种问题呢？
小妹真的很疑惑，拜托了！！

leifengta[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77488
精华 0
积分 514
帖子 748
信誉分 100
可用分 4517
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态离线

发表于 2014-4-18 16:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我一直没染出来,不知道是不是我用国产的试剂的原因了

Ao7[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76545
精华 1
积分 647
帖子 790
信誉分 102
可用分 4976
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-7
状态离线

发表于 2014-4-18 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是不是你洗的时间太长了？
这个不能超一点点的
我以前也碰到过
不过后来注意洗　的时间就好了

tangxin_80[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79896
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4621
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态离线

发表于 2014-4-18 16:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

银染对水的要求比较高，这也是实验成败的一个关键。

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2014-4-18 16:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

但是我其它的点可以染出来啊？其他量还很小的点都染出来了，而以前很明显量很大的蛋白质点却出不来？

而这些点做考染就可以显现出来

wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态离线

发表于 2014-4-18 16:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是一个点也染不出来呢，还是普遍染的颜色很浅呢？
此外，请说明你用的是那种银染方法或哪个公司的试剂盒。
我一般用安玛西亚的银染试剂盒。
就我的经验来说：
1．如果是一个点也染不出来，那要怀疑你一些重要试剂的质量了。比如硝酸银是否变质，或敏化液中硫代硫酸钠的质量等等。
2．如果是普遍染的颜色很浅，则个人认为，最有可能是因为水洗的时间过长，正如feiziwif战友所说的，水洗这步，要严格控制时间的。

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2014-4-18 17:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是以前很快出来的，量很大的蛋白点不能染出来了（糖蛋白），而那些量很小的点，现在仍然可以出来，

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2014-4-18 17:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我不是用的试剂盒，是自己配的。所有试剂都有质量保证的。

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线