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标题:【求助】PCR-SSCP跑胶为何溴酚蓝条带歪了？

cbou876[使用道具]
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发表于 2014-4-19 11:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR-SSCP跑胶为何溴酚蓝条带歪了？


我最近在做PCR-SSCP，可是每次跑时候都看到溴酚蓝的线跑歪了，染色后的胶最后看到条带也是歪的，不知是什么原因，请各位高手指点。


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发表于 2014-4-19 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚刚那个是电泳仪，


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发表于 2014-4-19 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另一边


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发表于 2014-4-19 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是染色以后的图片，还是歪的


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发表于 2014-4-19 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是最后的图片，


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发表于 2014-4-19 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
散热不好造成的,
起先都是挺直的,到后来才歪的,而且歪的很有特色,成个拱桥,
看你的电压,是稳压100V,但是要跑7,8个小时,温度肯定要控制好的,
你放冰里的么?或是4摄氏度的冰箱里?
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发表于 2014-4-19 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

肯定忘了放在冰里,呵呵
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cbou876[使用道具]
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发表于 2014-4-19 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #7 紫烟 的帖子

我没有放在冰里,我想问问,你说要跑7-8个小时,可是我跑140v10分钟.再跑100v,跑个1个多小时就到底了,为什么啊?
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nn255[使用道具]
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发表于 2014-4-19 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的产物是多少bp的? 胶的浓度是多少?
跑一个小时就到底,和你的胶有关系,胶短呗.用什么规格的?
如果温度控制好,应该跑的会很不错的,
看样子挺有趋势的.
几个样本具体描述下,大家帮你参谋下.
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avi317[使用道具]
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发表于 2014-4-19 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做SSCP的话,你的胶最好是预制胶(前段时间这个打一折特价) .
对于你现在的结果，可以用软件来进行处理比对分子量大小.现在的软件都有矫正这种条带弯曲的功能.
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