【求助】浓缩胶下层出现波浪状纹路

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标题:【求助】浓缩胶下层出现波浪状纹路

nut6694[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这两天配的浓缩胶凝固后，接近分离胶的地方总是出现波浪样的纹路，分离胶正常，APS和TEMED都是新的，其他试剂以前用过好好的，板子肯定是干净的，也注意凝胶过程周围没有震动，不知道怎么回事？请问大家怎么办啊？在线等啊

gogo[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主在配分离胶时，上面用什么封的胶？再加入浓缩胶前，是否将封胶液冲干净？是否没把水吸干净？

nut6694[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

水封，倒去水后用滤纸吸干，又放了十几分钟才加的浓缩胶

nut6694[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我也考虑过没吸干水的可能，不过如果是残余水的话，在板子一边加浓缩胶水应该浮在上层不是吗？

veiwu[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

建议再测一下浓缩胶中Tris缓冲液的pH，是否还是6.8。

lagua123[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

刚测完，6.81Sad
没辙了

avi317[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

bangqi_k[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

电泳中常出现的一些现象：
　　●︶条带呈笑脸状
原因：凝胶不均匀冷却，中间冷却不好; 电泳系统温度偏高。
　　●︵条带呈皱眉状
原因：可能是由于装置不合适，特别可能是凝胶和玻璃挡板底部有气泡，或者两边聚合不完全。
　　●拖尾
原因：样品溶解不好。
　　●纹理（纵向条纹）
原因：样品中含有不溶性颗粒。
　　●条带偏斜
原因：电极不平衡或者加样位置偏斜。
　　●条带两边扩散
原因：加样量过多。
胶的均匀度:
胶越均匀，条带越窄，分离越均匀。倒胶之前，一定要充分混匀，玻璃板一定要干净，双蒸水隔离时，一定要比较轻地加上去，避免稀释上层的分离胶.
等待你的结果.....

nut6694[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主是不是新手啊?不知道你波浪样的纹路是怎么样的?!
会不会配浓缩胶时TEMED和APS加多了,尤其是APS,现在天气热,胶凝的快,一些就先凝了,不均匀,看起来就有条线.
至于为什么分离胶不会,我想是因为体积大的原因吧,TEMED和APS显得不那么多。
楼主回去好好找找原因，找到了发上来，现在反馈有奖的,可以拿个小手的.
......

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1.就是在分界面（分离胶上方）浓缩胶下层出现像花边一样的线，但是上层很好。
2.我用5%浓缩胶（5ml），加了50ulAPS，4ulTEMED，大概20分钟凝的
我再试试，找到原因再汇报！

nut6694[使用道具]
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发表于 2014-4-19 23:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是丙烯酰胺问题，之前配的新的，结果一直就不好，今天换别人的丙烯酰胺就好了！

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