小中大本人不完全同意楼上的说法。首先,“针对磷酸化蛋白,我是先提取蛋白后-80°C保存蛋白好还是先-80°C保存组织后提取蛋白好 ”这种保存组织的方法就不是最合适的。通常我都会建议学生以最快的速度准确取下组织后,马上冻存在液氮中(用小的液氮罐或者稍大一点的保温杯装满液氮),待组织快速冻存后再转移到-80°C保存,这样才能组织能够保存最长的时间。其次,不变性的蛋白提取物比变性的能保存更久。比如说,是生肉冻存保存得更久,还是熟肉冻存保存得更久?当然是生肉。非变性蛋白在-80°C超过2 m肯定没问题,变性后就短得多,具体时间我并不清楚,是一个海龟告诉我的,所以我一直是这样做的。
顺便多说几句,我不清楚为什么取材后不马上检测。不论是什么检测,材料越新鲜越好,这是公认的。所以一开始就应该把试验的准备工作做好,包括抗体等试剂、设备、场地、人员、试验步骤等等。否则蛋白变性了就工作白干了。这种教训是很常见的