液相色谱

以甲醇和水位流动相，C18柱分析甲基丙烯酸脂，样品成分不复杂，才用了三次。
昨天晚上因为压力变化大，基线上下波动太大，怀疑是柱子不干净，用10%的甲醇冲洗了1个小时，再用纯乙腈冲洗2个小时。用乙腈洗的时候，压力到最后变成了0 PSI，但是仍有流动相流出。

今天想检测下仪器有没有好点。于是照原来一样的方法开机测试，PUERGE后，用乙腈冲洗了30min，压力在186-228 PSI 之间变化，然后用流动相甲醇67%，水33%，冲洗了1个小时，压力也是波动很大，在1180-1570 PSI 之间。

后来测试样品，流速0.8，三个小时后，压力从1100升到1500 PSI，并且，极度不稳定，导致基线也一直不稳定，忽高忽低的。

最后感觉实验结果不能用，于是停止实验，和昨晚一样冲洗柱子，最后用乙腈冲洗1个小时，压力由1300 跌倒了140 PSI， 没有到0.


想问问大家，这样子压力不稳，可能是哪些原因导致的。就我自己猜测，可能是单向阀的问题。

首先判断是泵引起的还是柱子引起的

把柱子拆下来，换另一个之前压力稳定的柱子！流速1看压力能否稳定，不稳定则是泵引起的。

泵引起的就有很多总了
1，单向阀
2，漏液
3，压力传感器
你需要逐一排除，出了问题找到原因最关键。

如果是柱子引起的，你这种情况不像是柱子脏了，柱子可能进气泡了，异丙醇低流速冲洗会好的

1 如果怀疑是单向阀的问题的话，拆下来超声试试，看效果能立刻变好不。

2 不知道楼主分析样品的梯度变化，看你描述来说，用纯乙腈能降低压力的话，是不是分析的过程中累积极性小的物品到系统中，导致堵塞了

3 压力不稳的情况有很多可能，单向阀，气泡等等

先要判断是仪器问题还是色谱柱问题，换个色谱柱试试，一个一个排除吧

谢谢你的答复。。
我已经找另一个实验室借了根柱子测试。
他们没有上样品，在流速为1的时候，用纯乙腈冲洗，压力在200到500 PSI间 变化。
他们的柱子以前是好的。
这是不是说明问题不在我柱子，是仪器的呢？

谢谢你的建议。
仪器不是我实验室的，我不敢随便拆。。。真头疼。
我的梯度的67%甲醇，33%水。 纯乙腈的压力是应该比我流动相小吧。。
换了根柱子，纯乙腈在200到500多 PSI之间变化。。。

那是不是是仪器的问题，不是我柱子得问题了呢?
谢谢！！

已经换了个，压力还是不稳，是仪器的问题吗？
谢谢！！

"昨天晚上因为压力变化大，基线上下波动太大，怀疑是柱子不干净"

这个推导过程，没怎么看明白……



“最后用乙腈冲洗1个小时，压力由1300 跌倒了140 PSI， 没有到0.”

是在多大的流速之下？



压力波动这么大，洗柱子是不能解决的，得找找系统方面的原因。气泡，单向阀，泵，管线泄露，等等，挨个儿排除。

甲基丙烯酸脂是不是有甲醇溶胀性？仪器或柱子是否被堵塞？

坛友。   先处理一下单向阀为好。