生物制药

课题需要制备脂质体，但是我对于脂质体完全不了解，现根据实验室的设备，选用了薄膜分散法制备空白脂质体，大豆磷脂：胆固醇为4:1，采用氯仿溶解，减压旋转蒸发形成薄膜，薄膜稍呈蜂窝状，加入磷酸盐缓冲液（ph7），磁力搅拌水合，结果不好。有人说是搅拌力度不够，后采用高速分散均质机，出现白色牛奶状液体，还很开心的以为做出来了。结果拿出来一看全是白色泡沫，静置2个多小时后上层为乳白色泡沫状，下层透亮。

请问各位大师：这是怎么回事？又是为什么？ 有可能是1、磷脂过久氧化了（磷脂是以前师姐留下来的，有一段时间了） 2、操作有误 吗？ 好的脂质体又该是怎么样的？ 求解答，感激涕零！

好的脂质体应该是混悬液，出现分层现象说明制备的脂质体不稳定，在排除磷脂原料本身的原因后，可考虑加入适量的抗氧剂，“薄膜稍呈蜂窝状：”可能有机溶剂没有挥干。

多谢回复！有机溶剂真的没有挥干，黄的漂浮物可能就是这样造成的。请教10ml的氯仿要多少时间才能彻底旋转蒸发干净？有的文献在旋蒸后，还真空干燥12h去除有机溶剂，这样有必要吗？

换了磷脂，泡沫少了，还想试着用注入法，但新的大豆磷脂完全不溶于乙醇，这是为什么呢？

可以试试高纯度的合成磷脂啊，DSPC DPPC等 可以去看看genzyme的合成磷脂

我制备的脂质体 圆底烧瓶中央部分成膜均匀 但瓶底总是成膜很厚 这是为什么呢？ 有时也成蜂窝状，如果是有机溶剂没有挥发干，但是我旋了很长时间了 那还能怎样挥干啊？

你的磷脂在乙醇里溶不了吗？上来就用氯仿，呵呵，毒性太大了。其实要是实验室小试研究，旋蒸完后不用再真空干燥，因为也不涉及到溶残控制。旋蒸完可以用磁力搅拌水化（不需要太剧烈的搅拌，否则泡沫很严重）也可以用超声波水化。水化后得到的是初品，肯定不稳定，需要再经均质、挤出、或探头超声减小粒径再经膜过滤整粒后脂质体才能稳定。