【求助】western 结果花带

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标题:【求助】western 结果花带

xyw5[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

蛋白分子量82KD。转膜条件为400mA70分钟。转膜后封闭时间为室温3小时，封闭液来自碧云天公司。一抗santa公司产品，稀释度1：800，室温孵育2小时；二抗为博士德公司产品，稀释度1：1000，室温孵育1小时。显影后显示花带，求高手相助分析原因，谢谢。

附件

2014-4-26 20:46

95645355.snap.jpg (12.01 KB)

hold住[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是胶没有混合均匀

yyaxw84[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那个花纹好像被水冲过一样。有点奇怪。你每次做都是这样吗？

yyaxw84[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

应该是结合一抗之前的某个步骤中出问题。

bangqi_k[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

problem should happened during gel making or when you tranfer you smear it.

baidukk[使用道具]
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发表于 2014-4-26 20:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果是湿转，重点排除转膜夹松动问题，参见下帖：
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/8056451')

xyw5[使用道具]
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发表于 2014-4-26 21:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是湿转,每次都这样.

ha111[使用道具]
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发表于 2014-4-26 21:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

建议封闭后，干燥半小时，还应该检查一下是否SDS-PAGE电泳时电压问题和胶的质量。

lagua123[使用道具]
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发表于 2014-4-26 21:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我以前用压片机曝光的时候也出现过类似情况，条带周围模糊且拖带，好像是跟显影液和定影液有关吧，你换个新的试试