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标题:【求助】请教小肽分离方法

daod[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请教小肽分离方法


先从海洋细菌发酵液中发现有抗菌小肽,预计为30左右氨基酸,请教各位高手如何实现分离纯化?
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glass[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不同的小肽方法应该不一样，可以参考相关的文献，然后在自己摸条件。不过如果是能耐抗菌的话，就要在分离纯化过程中主要无菌操作，不然可能得到量应该很少。
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般是用反向柱分离
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

量有多少？可以尝试用膜分离方法！
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huifeng0516[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还是在预处理样品以后使用反向-HPLC的“制备柱”分离
应该是最佳的吧
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xyw5[使用道具]
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发表于 2014-5-7 12:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

小分子多肽用RP-HPLC分离比较普遍，关键是选择什么柱子了，有许多公司卖C18，C8和C4等多种做分析和制备的柱子，可根据你的小肽性质进行选择。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2014-5-7 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
30个AA的多肽可能用C18柱比较合适
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tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-5-7 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想问一下楼主，你是如何判断你的活性物质是小肽的，我也正做这 方面试验，我的活性物质发酵液萃取只能溶于正丁醇，热稳定性很好，大概是什么物质，怎么判断。
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mysmdbl[使用道具]
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发表于 2014-5-7 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下，在做rp-hplc时，因为是未知样没有标样，如和才能确定洗脱条件合适，所有的峰都已经分开了呢？
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-5-7 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

洗脱条件是很难摸索的 ，有的时候不同的样品跑出来的图像是一样的， 真烦人，也只有你纯化好再上液相吧！
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