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标题:【求助】求助转膜的问题

PCR[使用道具]
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发表于 2014-5-7 17:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】求助转膜的问题


明天要做western-blot了，有很多不懂的地方！我的蛋白分子量101kD，用怎样的转膜条件比较好？我们实验室用的是湿转，用恒流100mA转3.5小时行吗？我是新手，请大家多多指点！谢谢！
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mickeylin[使用道具]
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 小中大

应该用湿转，我们都是恒压200伏，转40分钟就可以了，仅供参考
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ero11[使用道具]
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 小中大
我的目的蛋白是80KD和62KD，湿转该如何选择电流（只能恒流不能恒压）？
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eric930[使用道具]
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 小中大
分子量较大,用湿转较好.
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 小中大

我们这有人用130ma转过夜成功的,也有人用100ma转2.5小时成功的,怎么差别那么大呢?
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 小中大
用100V ，1.5h ，PVDF膜在甲醇中泡5分钟
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49888[使用道具]
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 小中大

是中国农大的吗？？
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发表于 2014-5-7 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的是105ma,3小时,明天才知道结果
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PCR[使用道具]
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 小中大

105ma电流是40v
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yueban-1147[使用道具]
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 小中大

350mA,1小时
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