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标题:【求助】帮忙看看2D胶图

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发表于 2014-5-8 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】帮忙看看2D胶图


IPG胶条:17cm，3-10NL
凝胶：12%


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2014-5-8 15:57
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发表于 2014-5-8 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

银染，上样量为300ug。
二向电泳我是以功率为标准，先是2w30分钟，在是20w，运行了大约6h。
请各位帮忙分析一下！！！
非常感谢。
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发表于 2014-5-8 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，以功率为标准的话，我是第一次听说了.
估计功率运行和恒压类似吧.不过一般都以恒流进行,其功率是慢慢变大.
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发表于 2014-5-8 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白点跑成这样是怎么回事呢？以前我也是以电流为标准，跑出的点还可以，难道以功率为标准就会跑成这样吗？？
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发表于 2014-5-8 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
        不知道你二向使用的装置是什么？在说明书中应该有功率的上限。
　　我做的时候不超过５Ｗ，一般在２Ｗ左右，或者１Ｗ过夜。
　　是不是功率太大的缘故。
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发表于 2014-5-8 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

二向的装置是 PROTEAN II xi，请问有人知道这个电泳槽的运行条件。
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发表于 2014-5-8 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品有没有问题，看样子你等电聚焦都没有跑开啊，还有你的胶面怎么黑乎乎的，银染试剂有没有问题
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ququer787[使用道具]
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发表于 2014-5-8 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的胶没法看,你首先得解决你银染的问题,要不就是试剂有问题,要不就是染色步骤有问题.
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2014-5-8 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是遇到过相同的情况
不过染色背景不是那么深
蛋白质点很少
是不是我们的SDS－PAGE胶出了问题
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2014-5-8 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得你的平衡液中的SDS量有些少，在平衡的过程中蛋白没有完全被SDS包裹。
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