【求助】GS115跟X33的区别

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标题:【求助】GS115跟X33的区别

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发表于 2014-5-9 11:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

紧急求助，GS115，X33两者的区别在哪呢？GS115的优点，缺点？X33的优点，缺点？
翻了N多资料，都没有找到描述两者具体差别的资料。

xyw5[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

GS115是组氨酸缺陷型的，在不含组氨酸的平板上是不长的，可用于筛选pPIC9k等含His4那个系列的载体
X33是原株，不管是否有组氨酸都可以生长，只能用于含Zeocin等抗生素抗性基因的质粒的筛选，但是生长会快一些

idea2011[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

他们两者在作为表达菌株的时候有什么区别呢？
我要做酵母表达，GS115和X33不知道选哪个好。
看了很多酵母表达的文献，大部分都用的是GS115，为什么不用X33？
因为在《Pichia酵母表达系统使用心得》（文章来源：生物网）这篇文章里
讲到X33这个菌株相对GS115而言，转化率和表达量较高；且由于是野生型，耐受性比较好。GS115与X33一样都是属于MUT＋表现型，但是据说会对外源基因表达有影响。所以对究竟选择何种菌株很疑惑。（我想表达的蛋白是分泌表达的，分子量较少。）

glass[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对啊
我也有这样的疑问，我看的文献是用的GS115，我刚刚表达一个蛋白，使用GS115，没敢用X33，想知道除了组氨酸以外还有什么区别，我用的是PPICzalpha A

vvmmoy[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

选择那个菌株主要是根据你所用的表达载体
pPICZaA不太了解，不过Z系列应该是含Zeocin抗性，应该是两种都可以用
pPIC9k必须用GS115
pGAPZ系列两种都可以用

idea2011[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 glass 于 2014-5-9 11:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
对啊
我也有这样的疑问，我看的文献是用的GS115，我刚刚表达一个蛋白，使用GS115，没敢用X33，想知道除了组氨酸以外还有什么区别，我用的是PPICzalpha A ...

呵呵，交流下啊，我用的载体也是pPICZaA。很想知道你为什么选择用了GS115？嘎嘎，不是因为大家都用它吧？：）

pengke1983[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个问题仔细看easy select和multi-copy这两种试剂盒的手册就清楚了。
pPIC9k必须用GS115或者KM71，由于酵母生长比细菌慢得多，大部分重组酵母在积累足够多的抗性因子以抵抗平板上geneticin之前就已经被杀死了。因此最有效的筛选geneticin抗性及高抗性克隆的程序需要先对HIS＋转化子进行选择，再进行不同水平geneticin抗性筛选。XM3本身就是HIS+，因此无法进行HIS＋筛选。
而pPICZa一类的，由于不需要HIS+筛选这一步，因此X33，GS115或者KM71都可以，推荐用X33，因为x33是野生型，耐受性比较好。

pengke1983[使用道具]
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发表于 2014-5-9 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

顺便问问楼上的战友，可否寄点pPIC9k或者pPICZa A或者pPICZa B或者pPICZa C来？
我有约40篇关于彼此酵母表达的硕博论文（一共115兆），可以作为交换。