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标题:【求助】蛋白含量10ug/ul，还能浓缩吗？

docsy[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白含量10ug/ul，还能浓缩吗？

相关疾病：
黑素瘤
大家好：
我的样品是恶性黑色素瘤裂解后，测蛋白含量大约10ug/ul，
目的蛋白350kd，还能浓缩吗？？可以用透析袋吗？
谢谢！！
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youyou99[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 docsy 的帖子

这个要看蛋白溶解度了
不过这个浓度已经很高了，为什么还要浓缩呢？
用超滤离心管更好一些，透析袋不容易控制条件，并且损失会多一些
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docsy[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

因为此样品的免疫荧光有结果，而做出来的western此样品没有条带，阳性对照有条带。
谢谢！！
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发表于 2014-5-10 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以浓缩，但是浓度不宜超过做标准曲线中最大浓度对应的那个点，毕竟标准曲线只是根据几个点做的趋势线，如果超过这几个点的范围，即使在曲线上可能也不是很准确的浓度．
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发表于 2014-5-10 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我个人感觉你做不出来不是应为蛋白不够浓的问题。。。这个目的蛋白分子量几乎突破WB极限了。。。。。。不知道你的阳性对照是使用的什么？
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docsy[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

to 楼上的：
因为免疫荧光有结果，所以老板让浓缩试试，唉！
阳性对照是大鼠脑组织，昨天已经ECL发光爆出来了，我用了好几个月！！
谢谢！！
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发表于 2014-5-10 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

为什么还要浓缩呢，这样的蛋白浓度保存最佳了.
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30moonriver[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哇，这么高的浓度还要浓缩啊？
如果有表达的话，WB应该可以检测出来的啊。免疫荧光的灵敏度不如WB的。可能是样品处理出了问题。
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qiangren789[使用道具]
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发表于 2014-5-10 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
黑素瘤
我也觉得浓缩也不一定有用，可是老板说免疫荧光有结果，就让浓缩试试。
样品是“恶性黑色素瘤”的组织，阳性对照也是组织啊，处理方法相同的啊？
谢谢！！
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