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这是bio-rad网站2D doctor关于竖纹的解释:
Problem: Vertical spot streaking
Likely Cause:
a) Equilibration time too short
b) SDS gel has wrong pH
c) SDS concentration too low in equilibration solution
Recommended Solution:
a) Prolong equilibration steps. Recommended equilibration time is 10–15 min per equilibration step
b) Ensure that the pH of the Tris buffer used for SDS-gel casting is 8.8. The wrong pH will decrease the mobility of the protein-SDS complexes and cause vertical streaks of protein
c) Ensure that the SDS concentration is at least 2% (w/v) in the equilibration solution
^_^,我觉得平衡的问题可能更大。
BIO-RAD大槽的缓冲液用完一次,如果不是马上跑第二次,建议不要再用。因为温度高放久了会长菌,缓冲液变粘稠,跑出来的胶银染背景很高,能把蛋白点都盖过去。
如果想用第二次,建议将正负极缓冲液混均匀再用。
我用过第二次的,没有出现你上图中那样的竖纹。只是电泳时间延长了,银染背景稍微高一些。
如果是正式实验,还是建议不要用了,考虑到批间重复的问题。