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标题:【求助】做WB时一抗体选用单克隆还是多克隆?

04906[使用道具]
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【求助】做WB时一抗体选用单克隆还是多克隆?

各位大侠,小弟刚准备做W:B正在选择抗体,不知是应该选用单抗还是多抗,谢谢
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u234[使用道具]
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单克隆抗体最好,它与目的蛋白特异性结合,识别识别能力强、杂带少,但是其价格要贵的多。一般多抗就可以了。
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zhenxin[使用道具]
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这要看你的蛋白了,对于像tublin和Actin之类的蛋白,多克隆抗体一样有很好的,很特异的。你在买抗体之前可以看看公司对于那个抗体的介绍,主要是它的WB图,在结合文献中报道的信息。当然,如果有钱的话,还是单克隆抗体好。
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lixi559[使用道具]
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当然首选单抗了,不过对于丰度比较高的蛋白,不受背景太大影响的话,多抗也可以。
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is2011[使用道具]
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WB是变性蛋白的检测,有些决定簇可能消失或被掩盖,在不能确定的情况下,还是推荐多抗的。
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kuaizige[使用道具]
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抗体的制备是依赖于抗原上的某个区域的几个氨基酸的来制作的,决定簇就是指的这个区域的这几个氨基酸。
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怎样才能知道变性时决定簇会不会消失啊?消失后多抗靠什么结合呐
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8
 
本人认为做western应该选用单抗还是多抗可以遵循以下原则:
1.首先看你的目的蛋白有没有单抗,很多蛋白到目前为止公司根本就没有提供单抗,那选择的余地就少了。
2.如果单抗多抗都有,看抗体的说明。一般公司的抗体说明书都指出该抗体适合做哪些实验如WB;IP;IHC;IF等,一般都会给出一个图示(如santa等)。当然一般我都选择单抗。如果说明书指出该抗体可以做Western,那么你就不用考虑什么抗原表位的问题。如果不可以做WB,那么就不用勉强了,另找一家公司吧。
3.考虑性价比,有时候不同公司的相同抗体差价挺大,甚至相同公司的抗体不同的代理商提供的价格也不同。
4.内参我们一般用多抗,国产的我也用过,价格便宜,效果也可以。其他抗体国产的就不多了。
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kswl870[使用道具]
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9
 

我也有个问题,我也要做WB,不知谁用过6-his (融合蛋白tag抗体)的抗体,哪家公司比较好呀?
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