生物制药

我的课题需要制备脂质体，但本人属临床专业，对脂质体了解尚浅，还望各位大师不吝赐教。

最近做的空白脂质体，蛋黄卵磷脂：胆固醇为2:1，采用甲醇、氯仿充分溶解后，减压旋转蒸发形成薄膜（约1.5h），薄膜稍呈蜂窝状，加入磷酸盐缓冲液（ph7.4），磁力搅拌水合后呈白色乳状液，过均质机，挤出器（第一次滤膜孔径为400nm，第二次为200nm），但静置约2~3小时后上层为乳白色，下层透亮，轻轻震荡后上层漂浮为白色絮状物。曾经延长旋转蒸发时间（原来为1h），重新配置过PBS，延长均质时间，由40°C水浴旋转减压蒸发改为室温，但结果均为上述情况。

请问各位大师：这种现象怎样解释呢？其可能原因又是什么呢？

体系已经被破坏,发生聚集-------因为楼主是经过均质和挤出，所以不好判断问题在那一步引入。

对于用薄膜法制备空白脂质体可以用超声法来做对比，以便于找原因。应该为带兰色乳光的透明溶液。

谢谢版主！

我之前还试过超声10min后再挤出，还有只是均质的，静置后都是这样子的，不知道我应该怎么才能找出问题出在哪里了呢？

甲醇氯仿那么毒的东西对于溶解EGG和胆固醇不如用无水乙醇安全。

换用无水乙醇来溶解，在溶解时要适当的摇晃并加热到30-40度。要让EGG和胆固醇溶解充分并混匀。

旋蒸后成膜，要拉真空继续干燥1.5-2左右。

加水相摇晃，在30-40度的条件下超声，不挤出也不均值。超声后放置2-3小时观察前后现象。

我又试用无水乙醇溶解，但是可能因为磷脂比较难溶于无水乙醇中，可能我溶解的也不够充分，所以开始时成膜效果不太好。

后来充分溶解成膜以后也延长了真空维持时间到3小时，因为实验室的超声机有点问题，所以用高速剪切均质，转速大概在7~8Kr/min，维持时间25min，没有挤出。

结果和前面一样，还是有絮状物。

出现絮状物的原因是磷脂和胆固醇已经析出了吗？其可能原因是有机物残留？磷脂氧化？脂质体粒径太大？还是什么其他原因呢？不知道还有没有什么好办法呀？

万分感谢！

会不会和我制备过程中，用的是抽真空旋转蒸发，而不是用氮气吹干有机溶剂有关呢？

跟氮气吹没关系.

但真空干燥要长一点,能否直接用去离子水来水化试试??不均质,不过膜.

请问后来找出原因了吗？我出现了相同的情况，不知道怎么办啊