小中大已经有多个战友提出此问题，版主亲身体验这个试剂做大鼠的肺、肝、人A549细胞，没有遇到杂带情况。和actin重在一起的条带怀疑为第3条，分子量相差较远的重点怀疑第1条，其次为第2条。如下：
1 二抗与蛋白交叉引起。做个只加二抗不加一抗的对照可以明确。此问题我曾怀疑为蛋白内Ig重轻链引起的交叉。
2 一抗与蛋白交叉引起。排除二抗的情况后，换个抗体试试吧。
3 蛋白的不同表达和修饰方式。我做过人细胞和大鼠细胞混合蛋白的caspase-3的western发现人和鼠的分子量还是有差别的。由此臆测：对于细胞较少出现这种情况而组织易出现，考虑细胞蛋白纯正均一，而组织是各类细胞（组织）的混合物，是否为蛋白在不同细胞有不同的修饰方式引起。或者，某种细胞的蛋白与一抗或二抗交叉反应，故包含此细胞的组织易引入与一抗或二抗交叉的蛋白。
