【求助】考马厮亮蓝法测蛋白

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标题:【求助】考马厮亮蓝法测蛋白

youyou99[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位高人请帮帮忙,我第一次制备考马厮亮蓝溶液,对照品和样品的最大吸收波长都是592nm，可是我第二次制备考马厮亮蓝溶液,对照品和样品的最大吸收波长分别是596和603nm,我用得是同一个对照品和样品,请问这是怎么会事?

zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

晕，我们都是直接用试剂盒。波长是固定的

glass[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你是测蛋白浓度吗？还是做不同波长下吸收曲线？
测浓度的话都按595固定波长测

youyou99[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我发现不同浓度的样品溶液（从20ug/ml到5mg/ml)加入考马斯亮蓝溶液后最大吸收波长从603nm变到595nm，这是为什么？？？？

wmp1234[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

没有懂你啥子意思？
测浓度还是吸收值？

duoduo[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

同楼上,测蛋白浓度吸收波长固定在595nm就是了。
最大吸收波长变化可能是样或分光光度计的问题。

avi317[使用道具]
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发表于 2014-5-26 11:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 youyou99 于 2014-5-26 11:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

各位高人请帮帮忙,我第一次制备考马厮亮蓝溶液,对照品和样品的最大吸收波长都是592nm，可是我第二次制备考马厮亮蓝溶液,对照品和样品的最大吸收波长分别是596和603nm,我用得是同一个对照品和样品,请问这是怎么会事? ...

这种现象好像经常发生啊，不仅是考马斯。我也想知道答案。

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发表于 2014-5-26 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

该方法测蛋白质浓度时，在1mg/ml 以下浓度适用。