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标题:【求助】请问SDS-PAGE浓缩胶凝固后胶为什么凹凸不平?

66小飞侠[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请问SDS-PAGE浓缩胶凝固后胶为什么凹凸不平?


请教各位高手:最近灌制SDS-PAGE浓缩胶时凝固后总是凹凸不平,现在不知道怎样才好? 浓缩胶的浓度:4%, 灌好浓缩胶后用正丁醇封胶凝固后,胶面凹凸不平,不知道是什么原因?请求请求行家指点迷津,谢谢!
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sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

怎么用正丁醇呀，要是胶面不平可以在灌完分离胶后用水封胶面，并等待凝固，这样会好很多，我们一般都这样而且省钱，不过水要用纯净水。
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

浓缩胶凝固后收缩的比较厉害,特别是当胶比较薄时出现凹凸不平,但
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dog002[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得饱和正丁醇( DDW + 正丁醇, stirring, 分层后取上层的正丁醇就可以了)封胶比较好,不过水封也可以,凹凸的主要原因是胶本身电泳结束后吸水膨胀不均匀、胶凝固不均匀等其他因素. 对此,我的办法只有三个字 : 跑大胶,hoho
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flower-201[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

封胶时如果用正丁醇的话得用水饱和过的，不然会夺取凝胶中的水分。
建议还是用水封。有人认为如果水封的话会使凝胶上部被稀释，从而使胶浓度不一，但好像没什么问题。
看自己喜欢了··
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IAM007[使用道具]
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 小中大

浓缩胶还要封吗？怎么做的，请说下，学习学习。
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就用水没有问题的，你的胶会不会没有混匀？
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cwcwcww[使用道具]
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发表于 2014-5-26 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

浓缩胶不用封，直接插梳子就可以了，
当然，如果喜欢的话插上梳子后也可以封上一层水。
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IAM007[使用道具]
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 小中大

我也觉得浓缩胶通常不用水封啊？如果是分离胶要封的话用蒸馏水不就可以了吗？但是加好分离胶后，加水时可以加的慢一些不要因为局部加水太快影响这部分的浓度。倒水时一定要倒干净，然后用吸水纸吸干再加浓缩胶。而浓缩胶可以加的稍满一些，因为胶凝固后液面会降一点。不过要是加样孔的容量不受影响的话，也可以用没有什么问题。
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IAM007[使用道具]
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 小中大

浓缩胶不是直接插梳子吗，而且是等凝固了之后再在梳子上盖上吸水性比较强的纸（我们用的是面巾纸），在纸上倒上水，然后用保鲜膜密封保存。
你说的凹凸不平是不是因为没有等胶完全凝住就密封保存了啊
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