【求助】哭求蛋白质提取方法!急需!

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boom[使用道具]
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小中大

哪位大师能提供羊绒毛总蛋白质的提取方法,为双向电泳做准备?也可以是有关的文献,不论是国内的还是国外的都可以,急需!!!先谢谢啦!

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小中大

我们做过：步骤见下：
1，样品剪碎，1mm左右
2，液氮研磨
3，脱脂：氯仿/甲醇=2:1溶液中振荡过夜
4，5000g离心去上清
5，沉淀做蛋白定量，溶于5M尿素2M硫脲，5%DTT
6，电泳
这是参考部分国外文献的步骤，我们实验室调整过可以用的
祝好运！

boom[使用道具]
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小中大

不好意思,还得再问问:氯仿和甲醇的浓度各需多少?尿素,硫脲,DTT它们各需要多少体积的?嘿嘿,初次接触实验,具体内容都不很熟悉,谢谢指导哦!!

mamamiya[使用道具]
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小中大

氯仿和甲醇的浓度什么意思不是说过是2：1吗就是实验中常用的分析纯的正常浓度呀！

boom[使用道具]
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小中大

哦.这个明白了,那尿素,硫脲,DTT呢?需要多少啊?是不是根据自己配制的样品确定啊?嘿嘿!我不是很清楚哦.....