【求助】用什么方法可以检测到溶液中含有硫酸铵？

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标题:【求助】用什么方法可以检测到溶液中含有硫酸铵？

niangao1980[使用道具]
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发表于 2014-5-29 11:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用硫酸铵沉淀蛋白后，用透析的方法取出蛋白溶液中的硫酸铵，有什么简便快速的方法能够确定透析完全了呢？

bamboo16[使用道具]
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发表于 2014-5-29 11:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

加点氯化钡应该可以吧

duoduo[使用道具]
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发表于 2014-5-29 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

同意楼上，加氯化钡可以，如果还是含有硫酸根，则形成白色沉淀

98776langtao[使用道具]
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发表于 2014-5-29 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

加NaOH溶液,闻有没有氨气溢出就知道了.

小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2014-5-29 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 98776langtao 于 2014-5-29 11:17 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

加NaOH溶液,闻有没有氨气溢出就知道了.

加氢氧化钠溶液是不行的，呵呵，朋友，不好意思我在这帮个忙纠正一下，不能误导别人。
必须是加氯化钡，若有硫酸根，则会形成沉淀。如果是PBS缓冲液中进行还需要先把溶液硝酸化，排除磷酸盐的干扰。因为磷酸盐与氯化钡生成磷酸钡沉淀，而磷酸钡能够溶解于硝酸。

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发表于 2014-5-29 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

呵呵！加氯化钡也是不妥的！如果是磷酸盐的缓冲液的话磷酸钡也是白色沉淀无法区分！最好的办法是使用纳氏试剂检测氨根离子，灵敏度比氯化钡高切不受磷酸根的影响！加入纳氏试剂显黄色表示有氨根离子存在！
缺点是纳氏试剂配制比较麻烦，但是配制一次可以放置很长时间的！

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发表于 2014-5-29 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Nessler试剂：奈斯勒试剂是由5g碘化钾，2.5%氯化汞和16%氢氧化钾的水溶液制成。
作用：用来检测水中铵的存在。
制取过程：称取5g碘化钾溶于5mL蒸馏水中，加入饱和氯化汞溶液（100mL约溶解5.7g氯化汞），与此同时不断搅拌，直到产生棕红色沉淀不再溶解时，再加16%氢氧化钾的水溶液（或用40mL50%的氢氧化钠溶液），混匀，静置。
不过我看国外还是常用BaCl2，可以先对溶液HNO3化，然后再加BaCl2。磷酸钡溶于过量HNO3，硫酸钡不溶。

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发表于 2014-5-29 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用化学方法检测比较麻烦，而且结果会出现不确定性，即使出现沉淀，未必就说明还含有硫酸氨
一般透析充分的话，比如3l透析体系中，100ml样品，透析12h，中间换液3次，基本可以进行后续的纯化或其他实验的
当然你可以测一下样品的电导，只要电导值足够低，就可以了。经验上说，单纯的20mM－50mM的tris缓冲液，不含盐的话，电导值低于10mS/cm，而含有硫酸氨后，电导会明显增大。

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发表于 2014-5-29 11:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

缺点是纳氏试剂配制比较麻烦，但是配制一次可以放置很长时间的！

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纳氏试剂有卖的，也不贵，一次只用 100 ul ，一瓶 500 ml 装的大概可以供一个实验室用上两三年。
关键是非常方便，透析以后，滴加1，2滴试剂，有没有颜色变化一看就知道。