【求助】分离胶半小时聚合,但浓缩胶2小时都没聚合

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标题:【求助】分离胶半小时聚合,但浓缩胶2小时都没聚合

qqshepherd[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我配的是12%的分离胶，4%的浓缩胶，配方按《分子克隆》。但分离胶半小时就聚合了，浓缩胶等了2小时还没聚，是什么原因呢？

bring[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一般来说分离胶本来就比浓缩胶聚合的快一些，但是40分钟到一个小时还没有聚合的话很可能就是你的AP用了很久没有新鲜配置或者是temed的问题，检查一下。

gemei0115[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我个人觉得一般来说分离胶要一个小时左右聚合 ,你的聚合太快是不是加AP或者加EDTA的时候加错了有一次我的胶很快就聚合了后面发现是加错了AP 的量 ,建议检查加入AP的量,还有温度也有关系可能做分离胶的温度比较高后来温度低了就慢了建议放入 37度恒温箱内聚合 ,另外浓缩胶也要封胶的插上梳子后加少量蒸馏水在表面有助于解决问题

qqshepherd[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢大家的意见.我今天把TEMED的量加大了,聚合时间短了些,但还是等了一半个小时.可能浓缩胶没有封胶的原因吧.下次试试!

vcve[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果在北方，温度是首先要考虑的问题。
我在广州，冬天的时候还需要温箱聚合呢。
先试试放温箱，37度，不要温度太高，否则胶会不匀。

qqshepherd[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

今天又跑了一次,TEMED的量加倍了,但浓缩胶还是一块胶聚合了，另一块始终没聚(我同时跑两块胶).不知是不是灌胶时没混匀?

u234[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不知道楼主那儿室温是多少，如果偏低，可以将单体配好后抽气十分钟左右再加入AP和TEMED；或者将配好的单体放在37度水浴锅内适当加温，再加入AP和TEMED后灌胶，这样聚合会比较好。另外，加入TEMED后最好将烧杯摇一摇，混匀后再灌胶，不用担心，胶不会马上凝固的。如果马上凝固，说明你加的TEMED太多了。AP的量一般固定，不要随意改动。

qqshepherd[使用道具]
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发表于 2014-5-31 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

先谢谢哈.我们这儿室温就20度左右,也不算太低.下次试试先把单体37度加下温