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标题:【求助】请问SDS-PAGE胶，制胶时浓缩胶不凝固是怎么回事啊？

veiwu[使用道具]
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发表于 2014-6-4 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请问SDS-PAGE胶，制胶时浓缩胶不凝固是怎么回事啊？

制SDS-PAGE胶时，分离胶，夹层胶，浓缩胶的浓度分别是16.5%,10%,4%,做了多次实验，分离胶和夹层胶都能凝固，就浓缩胶经常不凝，是怎么回事啊？
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发表于 2014-6-4 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是引发剂加得太少的缘故？
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veiwu[使用道具]
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 小中大
这样啊，那为什么之前的那些有凝固呢？原来以为是AP不是现配的缘故，TEMED也加够量的，它很奇怪，有时候能凝固，有时候又凝不了．
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发表于 2014-6-4 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
既然不凝，就肯定是试剂的问题，混合要均匀。
建议将一些试剂重新配制
同时可以将TEMED适当增加，我们曾经加到过20ul,多加些是没有大碍的
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veiwu[使用道具]
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发表于 2014-6-4 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，TEMED加多的话，那ＡＰ是不是也要加多些啊，回去再试试看了
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veiwu[使用道具]
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发表于 2014-6-4 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家的意见,重配试剂试试了.
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发表于 2014-6-4 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

既然TMEED没问题（应该没问题才对），AP 又是新配的，那不知道您是否有如下问题：
1。保证没有漏加试剂！
2。你的AP每次用几点，保存条件如何？
3。加完试剂以后是否充分混合
实在不行，那就只能重配试剂了！
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发表于 2014-6-4 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是温度的问题，我也遇到过同样的问题，可能这个季节温度高，胶的浓度低不太好凝，我4月分做实验时凝的还挺好，7月分做的时候就凝的不好了
试着在较低温的环境下凝胶。
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发表于 2014-6-4 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

温度的问题不大.
我前段时间也碰到浓缩胶不凝固的问题.问题主要是出在AP,AP极易潮解,应 该注意它的保存环境,在每一次从新配AP之前应该观察AP是否潮解.
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2014-6-4 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的经验是，温度在37度是容易凝，低了倒不容易了，如果试剂没有问题 会不会是最简单的原因，板子么有洗干净？
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