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标题:【求助】大肠杆菌细胞破碎

free[使用道具]
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发表于 2014-6-14 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】大肠杆菌细胞破碎


100g大肠杆菌溶于1L破碎液里（破碎掖：50mM Tris-Cl(PH8.5) 5mM EDTA 0.14M NaCl），搅拌，发现菌液发粘，菌体不能够很好分散，用高压匀质机破碎，加压后，菌液不能进入匀质机，速度很慢，请问是何原因？能有好的办法解决，很好用匀质机快速破碎菌体？
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niangao1980[使用道具]
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发表于 2014-6-14 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

粘稠是因为基因组DNA的存在,用超声处理就好了,很方便的
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发表于 2014-6-14 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议将破碎液的量 加大
不能很好分散可能是量太大
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caihong[使用道具]
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发表于 2014-6-14 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
超声处理5－10分钟，菌液粘度即可大大降低，也可促进菌体分散。
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发表于 2014-6-14 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我没有超声波破碎仪，将破碎液的量 加大，这对于后期处理带来量大。
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发表于 2014-6-14 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没有超声破碎仪，那用大的搅拌子，加大搅拌转速和加长搅拌时间试试，也许这样能降低粘度
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发表于 2014-6-14 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最好能用超声破碎
如果菌液浓度高的话就是会很粘
我上次摇的菌液就是这样，超声破碎2个小时以上才行……
痛苦的经历阿
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发表于 2014-6-14 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没有你说的这样吓人吧，如果这样，那没有多大意义。
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2014-6-14 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我上次做就是遇到了这样的问题
破碎效果很不好
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free[使用道具]
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发表于 2014-6-14 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还得请教工业化生产中大肠杆菌细胞怎样破碎的？
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