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标题:[未解决][求助]固相多肽合成

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
风往尘香[使用道具]
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发表于 2014-6-19 14:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]固相多肽合成

小弟最近在做多肽的固相合成，遇到一些问题。我用的是2-Chlorotrityl Chloride Resin，第一个接的是Fmoc-Cys(Trt)-OH 托保护后kaiser 测试为并不是蓝/紫色，而是显棕色，接上第二个氨基酸Fmoc-Arg(pbf)-OH，脱保护后kaiser 测试显黄色，不知道是什么原因引起的。文献中说第一个氨基酸为Acm保护的Cys时，哌啶脱保护会有副反应发生，但也不会影响-NH2。有做这方面的大神，能帮忙解决一下吗？
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adg[使用道具]
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发表于 2014-6-19 14:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般在固相合成中有3个氨基酸在脱保护后显色不是紫色而是红棕色，Cys Pro His这三个氨基酸在脱保护后树脂显色为红棕色是正常的，还有你这个树脂是二氯三苯基树脂对后面脱保护后的树脂颜色也有一定的影响（这类树脂在接过几个氨基酸后脱保护的颜色不是很明显，一般树脂会显棕色）。所以在接上第二个氨基酸Fmoc-Arg(pbf)-OH，脱保护后kaiser 测试显黄正常。 你可以增加哌啶的浓度还有脱保护的时间这样树脂的颜色会明显一点。
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ass[使用道具]
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发表于 2014-6-19 14:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做过一个Fmoc-Cys(Acm)与Leu-OtBu接上的二肽，用的液相合成，脱Fmoc就是用的哌啶，反应情况还挺好，哌啶量过多收率会降低，巯基上的保护剂还是比较稳定的
只能帮你到这儿了
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happydream[使用道具]
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发表于 2014-6-19 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你这个现象很正常，二氯三苯基树脂就是这样。只要不是显示那种亮黄色很透明就行了。
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iop[使用道具]
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发表于 2014-6-19 14:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
现在在哪里高就呢
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