小中大1. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50:1）配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 完全溶解蛋白标准品，取10微升稀释至100微升 ，使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀
释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
3. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20微升。
4. 加适当体积样品到96孔板的样品空中，加标准品稀释液到20微升。
5. 各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置30分钟。
注：也可以在室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应
会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或延长孵育时间。
6. 测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出蛋白浓度。
