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标题:【求助】考马斯亮蓝

sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】考马斯亮蓝


我的考马斯染色后很难脱色，不知道是不是浓度过高！
请高手们指教！
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glass[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
告诉你一个很好的方法,而且还比较省钱,我们原来的实验室的老板娘很抠,不让我们用脱色液,用水脱的效果又不好,我们最后终于发现在水里面加NaCl的脱色效果很好,但是请楼主注意,要经常盯着看,这个方法很容易脱过了.
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ending[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这跟浓度过高应该没多大关系,考马斯染色一般只需30分钟左右就可以了,假如染色时间过长就很难脱下了,不过你也可以在脱色液中脱色,不过脱色温度要保持在50度左右,你可以放在烘箱里过夜脱色或至少脱色6小时,看看能不能脱掉吧!
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hyuu[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多换几次脱色液肯定可以脱掉的,当然温度高一点速度回更快一点
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windy+++[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有个方法自己试过的，很好用！如果的胶只是用来粗鉴定的话，你可以这样做：
1 染色：用考液没过胶面，加热10分钟。
2 脱色：用自来水没过胶面，煮到你能看清楚条带就行了
这个方法虽然快速但是也要看情况而定。不要脱色时间太长，否则条带扩散严重哦。
不知道适合你用吗？希望能帮到你！
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发表于 2014-6-28 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

脱色液自己配很便宜啊．已酸100ml甲醇450ml加水至1000ml.我用考马斯亮蓝染了半小时，脱了三十分钟就很清晰了，每十分钟换一次脱色液．
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发表于 2014-6-28 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对，用脱色液很方便的！
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vcve[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是考染．一般是考染过夜．第二天用自来水褪色．可每次低分子那块褪的还好．可高分子那块底色还是很浓．是不是和我用自来水褪色有关．楼上几位说用煮的，胶不会煮化了吧？况且蛋白会不会变性啊？
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yychen[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用水煮胶是一个很好的方法，我一般胶染完后都用水先煮10-15分钟，微波炉高火，就可以看见条带了。要往水里加盐也可以，听说效果更好，我用过最BT的方法是用脱色液煮，里面还加了很多的小海绵块以增加脱色效果。当然煮的时间就不能和水煮的时间一样，要短很多，只要3-5分钟左右。这样即使染了很久的胶很快也就能看见条带了，只是煮了以后乙酸会挥发味道很重，要注意不要吸入。
胶是不会煮化的，只是注意水要多加，不然会煮破的，关于蛋白变性的问题，你跑SDS-PAGE的时候蛋白就已经变性了，煮胶不会让它更变性。 ：）
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有一种简便快捷的方法，染色后先用纯醋酸脱色7－10min，然后再用脱色液1h搞定
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