【求助】细胞裂解液里可以不加PMSF吗？

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标题:【求助】细胞裂解液里可以不加PMSF吗？

9900[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室的PMSF粉末来历不明，
而且PMSF的毒性很大，有人建议我不用加它，
可以吗？
有人这样做过吗？？

gogo[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的PMSF粉末来自Sigma公司，价格也不太贵，但是还有其它的如蛋白酶抑制剂的cocktail,做2D最好用蛋白酶抑制剂中一种，当然后者更好，价格也贵得多。个人建议，仅供参考。

fei1226com[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以不用PMSF,
北京天来生物有蛋白磷酸化酶抑制剂复合物
cuturl('www.biolife.com.cn')

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

文献上用的较多，你可以比较一下，我的试验中发现蛋白酶抑制剂能够增加总蛋白种类，这也与你所需要的蛋白有关。

fox_79[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以不加PMSF，但得补充其它的蛋白酶抑制剂，比如cocktail，要不然蛋白很有可能被降解

tuuu2[使用道具]
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发表于 2014-7-2 10:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以不加PMSF，我也曾经在试验中证实过这一点。

831226[使用道具]
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发表于 2014-7-2 11:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的做法是如果裂解后的产物立即进行检测,可以不加;如果暂时不用,最好加PMSF或其他并冻存于-80度,减少蛋白降解.

applebook=213[使用道具]
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发表于 2014-7-2 11:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个问题并没有唯一的答案，关键看你的目的蛋白是什么情况，如果你对目的蛋白不是很清楚的话，推荐加入，PMSF是一种不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制羧肽酶Y,糜蛋白酶,Factor Xa,木瓜蛋白酶,纤溶酶,蛋白酶K,枯草杆菌蛋白酶,凝血酶及胰蛋白酶等，有好些实验室在细胞裂解液中只加这种PMSF而不加其他的蛋白酶抑制剂，还有一种情况就是裂解后快速使用或冻入负80度冰箱，也能减轻蛋白的降解程度！但是如果要使用需要特别小心，剧毒！仅供参考！