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标题:【求助】SDS-page 胶配好后放置需要泡在...

IAM007[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】SDS-page 胶配好后放置需要泡在...

看到一些书和园子中的一些帖子都说道SDS-PAGE胶配好后要放置一段时间甚至过夜，放置时是就那样插着梳子放还是泡在电泳缓冲液里？谢谢
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jkobn[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
胶配好后插着梳子，用保鲜膜包一下，直接放在冰箱4度（不必泡在缓冲液里）
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

SDS-PAGE胶配好后其实也可以立即使用，不过可能胶聚合不充分对电泳分辨率有一定影响。不过一般问题不大，这两天我们做了十几块胶都是做完后立即电泳，然后转膜做western，跟以前配好胶过夜后再用没有明显差别。
另外，很多资料介绍SDS-PAGE胶配好后放置一段时间后再用，主要是让胶聚合充分一些，最常用的是把胶放在4度过夜，不过最好不要插着梳子过夜，这样会影响电泳分辨率（可能是由于胶干了的缘故），可以把梳子拔掉后在加样空里加入少量缓冲液或者水也可，不要让上层胶干了。不用把胶泡在电泳缓冲液里。
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huifeng0516[使用道具]
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 小中大
骨髓液静置后,取血浆,用淋巴细胞分离液分离离心后,提取单个核细胞总是混有许多红细胞怎办?
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gogo[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
个人体会，SDS-PAGE胶配好后只要凝了，就可以立即使用，不会有太大影响，但不能放置时间长了，过夜问题不大，但时间再长加样口就很容易起泡，不论加不加梳子都有起泡的可能。
如果迫不得已要放置几天，最好放在湿盒里，再4度存放，这样就会减少干燥起泡的可能了
请大家批评指正
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不能泡，因为胶的ph和缓冲液ph不一样，泡久了就不好了
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plaa[使用道具]
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发表于 2014-7-2 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不用放很长时间,只要基层胶凝了就可以进行下一步了.对实验没什么影响
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发表于 2014-7-2 15:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般压缩胶现配现用，分离胶可以过夜放置。我做实验都是头天晚上做好分离胶，到第二天早晨来再做压缩胶，到了晚上就可以照像了。

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看到一些书和园子中的一些帖子都说道SDS-PAGE胶配好后要放置一段时间甚至过夜，放置时是就那样插着梳子放还是泡在电泳缓冲液里？谢谢
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IAM007[使用道具]
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 小中大

谢谢，但是书上说不能放4°C冰箱过夜，SDS会析出，郭尧君的书上和园子里有一篇专讲SDS-PAGE电泳问题的帖子都说是切忌把配好的胶放冰箱，如果是普通的page胶就必须放冰箱。
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xiaoxiaoniao[使用道具]
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 小中大
我们实验室的经常会在晚上把分离胶和积层胶都加好,待拔出梳子之后放入电泳缓冲液过夜,室内温度不能太高,不会影像,一般第二天早上就加样电泳,不要放太长时间.
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