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标题:【求助】蛋白质测序

cj_mondy[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白质测序


各位大侠，请问提取植物组织全蛋白后，SDS-PAGE上的单一条带能直接测序吗（是否可确定是单一蛋白）？质谱测序＆传统Edman测序的差别是什么？看了院子里的一些帖子，是说质谱只能测定已知蛋白而对新蛋白不能鉴定是吗？
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damingxia0904[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
SDS-PAGE上的单一条带能直接测序吗（是否可确定是单一蛋白）？
1〉可以！
质谱测序＆传统Edman测序的差别是什么？
2〉前者可以random 地获得酶解片段的肽段氨基酸信息；后者多从N-端开测，且所测数目<20。
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

质谱测序的价格是多少？
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发表于 2014-7-5 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一个蛋白质带如果酶解处理好只打质谱大概150～200元，如果只提供电泳胶带的话需要600左右。
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04906[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我04年在协和测的序是180元/氨基酸,传统N端测序,3个500元,现在不知道降价了没有?
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发表于 2014-7-5 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MALDI鉴定不包括酶切的话大概300。
我们实验室可以做LC-MS/MS鉴定（包括trypsin酶切）大概是1500-1600RMB/每条带或点，想鉴定的话可以和我们联系:-）
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发表于 2014-7-5 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
再对上面两个问题，发表自己的看法：
SDS-PAGE上的单一条带能直接测序。但是不能确定是否是单一蛋白。
对新蛋白，质谱也可以得到这个蛋白的某些片断的序列，从而对这个蛋白进行预测。
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发表于 2014-7-5 16:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MALDI鉴定不包括酶切的话大概300。
我们实验室可以做LC-MS/MS鉴定（包括trypsin酶切）大概是1500-1600RMB/每条带或点，想鉴定的话可以和我们联系:-） ????????
我想测序的，但是怎么跟你联系啊！也不留个地址，或电话什么的。
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3648755[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我04年在协和测的序是180元/氨基酸,传统N端测序,3个500元,现在不知道降价了没有?

===========================================

今天刚把样品送国家生物医学仪器中心
开机费1000元，含5个氨基酸序列，以后每个氨基酸200元
哀哀，没降价
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子衿青青[使用道具]
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发表于 2014-7-5 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MALDI鉴定不包括酶切的话大概300。
我们实验室可以做LC-MS/MS鉴定（包括trypsin酶切）大概是1500-1600RMB/每条带或点，想鉴定的话可以和我们联系:-）
老板刚买了一台LC-MS,想做蛋白LC-MS/MS鉴定（包括trypsin酶切），正在学习中
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