液相色谱

　　我在做高蛋白食品的防腐剂测定（苯甲酸钠和山梨酸钾）的时候，样品中苯甲酸钠的峰型很好，但是山梨酸钾基本上都是峰分岔。
　　我的标准曲线范围为5ug/mL~50ug/mL，样品中的浓度肯定是在我的线形范围内，做标准品的的时候没有出现过这个问题，然后我又配制了一个纯度较高的防腐剂样品做对照，峰型也很好。之前有一次我连续5次上同一个样，前4次分岔结果到第5次的时候峰型又正常，之后再做又分岔，真的不知道是怎么回事。
　　我现在怀疑是柱子问题，我用的是Bandapak（TM） C18 3.9mm X 300mm X 10um 125A的柱子，我知道这是蛋白柱，以前用它分析另一个化学物质的时候效果还不错所以就没有换过，而且我虽然想换symmetry的分析柱但是上面一直不给批。
　　请问会不会是柱子本身的问题？！该从什么方面去确认？！
　　

不知道会不会是所用的缓冲液有问题呢。

标线样品和实际样品用的溶剂一样么？最好用纯水溶解或者是用起始流动相溶解

　　我用水溶解做过，峰分岔；用起始流动相配制也是分岔。缓冲液是0.02M的乙酸铵：甲醇=95：5，每天都是现用现配，当然也用0.45水膜滤过。溶解样品的时候用的是单一的0.02M的乙酸铵。唯一有点不同的是因为样品是高蛋白物质，我是用的亚铁氰化钾和乙酸锌做的沉淀剂。

那会不会是PH改变了呢，你可以看看样品溶液的Ph吧

　　水做溶剂和流动相作溶剂的样品我都测试过pH和电导，pH均在5.9~6.2，电导率差距比较明显一些。不过我记得电导只会影响保留时间不会影响峰形吧？
　　样品出峰异常的主要问题是苯甲酸钠的峰形一直很好，但是随后出来的山梨酸钾就一直分岔。