药物分析

以下为2010版药典“天麻钩藤颗粒”中钩藤的TLC鉴别试验：

取本品6g或3g（无蔗糖），研细，用浓氨试液湿润后，加氯仿50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5~10μl，分别点于同一以1%NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-氯仿-丙酮-甲醇-浓氨试液（4:5:4:3:0.8）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

小弟有一点不明：上述提取方案，包括浓氨泡、氯仿提，应该是针对钩藤的主要成分--生物碱类成分的吧，这样的话，为何后面的紫外检测波长选365nm，而不是选254nm呢？钩藤中的主要成分-吲哚类生物碱，都是在230~250左右有紫外吸收啊，365nm基本没有吸收。此处很纠结，请达人指教，非常感谢！！
另外，用NaOH制备的硅胶板，也是利于生物碱类成分形成斑点吗？还是其他作用呢？再谢！
bow~~

365  254两处的吸收各是多少？

230~250左右有紫外吸收那时紫外分光光度法的，和接受紫外光后激发出荧光不同。用那个波长的紫外灯都是根据实际情况决定的。

用NaOH制成碱性板，可以减少碱性成分拖尾。

不知楼主所说的生物碱在365和254处的吸收分别是多少？
365处的吸收最大？
亦或者254处有辅料成分的的影响吧？
楼主可以试试的~~

一般的TLC 鉴别只要斑点分清楚即可，不会像HPLC一样精确，254nm是荧光板子，不知道加碱后对荧光剂有没有影响

定性检测和定量对波长的选择不一样。定量是最好选最大波长，如果没有干扰的话。定性，365和254nm波长下紫外光斑点是不一样的。

NaOH制板是为了防止生物碱斑点拖尾。像液相中检测生物碱加入三乙胺。

感谢以上回复，受益匪浅，谢谢大家！！
钩藤中几个主要生物碱的紫外吸收，我是通过HPLC里看DAD的，最大吸收多集中在240nm附近，360nm没有吸收
另外，想问一下：硅胶G板和硅胶GF254板，在使用上有哪些不同呢？分别适合什么情况？是否可以相互代替？
问题较多，呵呵。。
再谢！！

小弟愚昧，呵呵，再问一下：
TLC的检视波长选择，与其紫外最大吸收有关联吗？还是说关系不是很大。。。
对于您说的“接受紫外光后激发出荧光”，我的理解是：看TLC板时，根据实际激发的情况，选择TLC检视波长(254nm or 365nm)，而与该物质本身的紫外最大吸收无关？不知对不对 请指正 呵呵
谢谢！！

一般是选用最大波长，但是有时候因为种种原因也不用最大波长（例如：在最大波长处杂质干扰严重就不选用）
做生物碱薄层时候，为了防止斑点拖尾一般会采取1、展开剂中加入少量的碱2、展缸中放入氨水饱和展缸3、铺板时用碱制备薄层板

送你一句话：最好的不一定是适合你的，适合你的才是最好的！