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标题:[未解决]采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺

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majinfei8[使用道具]
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采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺

最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺,不知各位有否这方面的经验,能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件,谢谢!

[ 本帖最后由 miracle 于 2010-10-13 14:22 编辑 ]
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  • miracle   2010-10-13 13:45  可用分  +2   鼓励坛友,发起话题交流!欢迎常来! ...
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naren4545[使用道具]
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原帖由 绿茵ssein 于 2010-10-14 17:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
坛友,这没做过,帮不了你

还是谢谢你的关注。
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majinfei8[使用道具]
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原帖由 naren4545 于 2010-10-13 13:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
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非常感谢您提供帮助。
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majinfei8[使用道具]
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回复 #5 majinfei8 的帖子

我有以下两个问题,希望大家能分享经验,谢谢大家。
1、        标准曲线的建立方面,目前报道的文献大多采用溶液直接进样的方式,对于这种方法我有一点疑问:临床实际样品在处理过程中会有一个提取回收率的问题,当待测物与内标的提取回收率相同的时候,采用溶液直接进样的方式制备标准曲线或许可行,但事实上两者的提取回收率很有可能不一样(因为空白血浆不易获得,这一点无从考证),那么采用这种方法制备标准曲线的话,得到的结果肯定是不可靠的。但是我查了很多文献,包括国外的,大都采用这种方法,希望各位专家能给予指点。此外,也有一篇文献采用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆,在将标准品加入其中,按照实际血浆样品处理过程同法处理来制备标准曲线。另外有文献将实际血浆用氧化铝吸附处理后的血浆当作空白血浆来制备标准曲线,但是操作很繁琐。个人觉得可以用牛血清白蛋白配制模拟血浆比较可行,但是毕竟改基质与实际的血浆不一样,这种操作是否切实可行,希望各位专家给予指点。
2、        稳定性方面:
大部分文献表明儿茶酚胺在室温很不稳定(但也有文献说很稳定),目前配制储备液的方法主要有以下几种:1)直接用水配制2)加盐酸3)加高氯酸,关于稳定性方面,不知各位有何经验分享。
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个人认为:

标曲是为了说明你样品在检测时的响应是不是成线性,主要是考察仪器和所选取的色谱条件的性能

注意样品处理时候的误差,可以通过加样回收来说明,要是回收率比较低,但是稳定的话,可以用系数来校正实际含量
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eedc-dcnge[使用道具]
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回复 #6 majinfei8 的帖子

楼主第一个问题,说的我有点迷惑~
待测物与内标的提取回收率?往下接着看 。这个内标是内标法中内标物质?还是其他什么意思????
如果是内标法中的内标物质的话,这个内标物还要回收率实验吗???
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majinfei8[使用道具]
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回复 #8 eedc-dcnge 的帖子

我这里的内标指的是内标法中的物质,我以前液质联用做的比较多,基质对化合物的响应影响较大,一般都要进行提取回收率和基质效应的考察,而且标准曲线的制备一般都要模拟实际样品进行相同的操作,所以液质里一般很少有采用标准品直接进样制备标准曲线的情况。而我看液相中这种情况较多,是因为基质对对化合物的响应影响不大的原因吗?在儿茶酚胺的测定中,能否采用溶液直接进样的方式制备标曲,希望大家能给予指点,谢谢。
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majinfei8[使用道具]
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回复 #7 dragon5 的帖子

您的意思是可以采用溶液直接进样的方式来制备标曲?
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