液相色谱 » 讨论区 » 分析百问 » 如何提高理论塔板数和分离度?急!!!

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[已解决]如何提高理论塔板数和分离度?急!!!

  [已解决]本主题悬赏 可用分 15  
jukinzhu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 43218
精华 0
积分 172
帖子 18
信誉分 103
可用分 671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-7-28
状态 离线
1
 

如何提高理论塔板数和分离度?急!!!

检测样品:地塞米松磷酸钠注射液(含量)

色谱条件和系统适用性试验 :
色谱柱:C18
流动相:三乙胺溶液(量取三乙胺7.5ml加水至1000ml,用磷酸调PH至3.0+/_0.05):甲醇:乙腈=55:40:5
检测波长:242nm
以地塞米松磷酸钠计理论塔板数一般为7000,地塞米松磷酸钠与地塞米松之间分离度大于4.4
样品先用水溶解,再用流动相稀释。20ul进样

我用的是150cm的柱子(新柱),柱温25度,流速1.0ml/min
检测结果:理论塔板数 5660
                    分离度     3.7
                    拖尾因子1.033
                    RSD%  0.16%
请教一下怎么样才能提高理论塔板数和分离度呢?谢谢!!!
顶部
thereyoube[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 799
精华 29
积分 5843
帖子 1822
信誉分 202
可用分 6936
专家分 1530
阅读权限 255
注册 2007-11-21
状态 离线
2最佳答案
 

回复 #1 jukinzhu 的帖子

是药典的条件还是自己摸索的方法。如果是药典的方法,调节流动相比例或者更换一根色谱柱。方法摸索可以更改流动相组成,提高柱温,减低流速等
顶部
gitde[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 14083
精华 4
积分 1866
帖子 717
信誉分 121
可用分 2368
专家分 288
阅读权限 255
注册 2009-3-20
状态 离线
3
 
可以调节一点流动相比例吧?
顶部
出国吧[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 955
精华 5
积分 3012
帖子 797
信誉分 141
可用分 3400
专家分 811
阅读权限 255
注册 2007-12-4
状态 离线
4
 
药典要求的条件应该都不能变吧,换个长点的柱子,250mm的试试,柱效和分离都应该都有改善,不过具体能不能达到要求还是试试才知道
顶部
fjdlgldg[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 11239
精华 10
积分 2778
帖子 1204
信誉分 142
可用分 4567
专家分 462
阅读权限 255
注册 2008-12-28
状态 离线
5
 
增大点有机相比例试试
顶部
ttkl533[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 808
精华 30
积分 5474
帖子 1683
信誉分 198
可用分 5486
专家分 1387
阅读权限 255
注册 2007-11-22
状态 离线
6
 
理论塔板数取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。你柱子固定的话,要改善理论塔板数和分离度只能往流动相方面下工夫
顶部
smmdcryctc[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 44553
精华 6
积分 916
帖子 304
信誉分 124
可用分 1730
专家分 180
阅读权限 255
注册 2010-8-19
状态 离线
7
 


QUOTE:
原帖由 jukinzhu 于 2010-10-13 19:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
检测样品:地塞米松磷酸钠注射液(含量)

色谱条件和系统适用性试验 :
色谱柱:C18
流动相:三乙胺溶液(量取三乙胺7.5ml加水至1000ml,用磷酸调PH至3.0+/_0.05):甲醇:乙腈=55:40:5
检测波长:242nm
以地塞米松磷酸钠计理论塔板数一般 ...

换条长柱!可以增加理论塔板数和分离度
顶部
jukinzhu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 43218
精华 0
积分 172
帖子 18
信誉分 103
可用分 671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-7-28
状态 离线
8
 

回复 #5 thereyoube 的帖子

谢谢您的回答,在没有规定柱温和流速的情况下,一般选多少呢?这样的话这两个条件就可以随便调整了,对吗?
顶部
jukinzhu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 43218
精华 0
积分 172
帖子 18
信誉分 103
可用分 671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-7-28
状态 离线
9
 

回复 #3 出国吧 的帖子

您好,方法和条件都是药典上的,就是柱温和流速都没有明确规定,所以我选择了常温和1.0ml/min 的流速
顶部
kflsjjfdl[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 798
精华 21
积分 4494
帖子 1697
信誉分 177
可用分 5845
专家分 984
阅读权限 255
注册 2007-11-21
状态 离线
10
 

回复 #7 smmdcryctc 的帖子

同意此方法,能不调节就不要调节其它参数。
顶部