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标题:[未解决]关于高效液相色谱流动相条件摸索

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
怒吼雄狮[使用道具]
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发表于 2010-10-15 18:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关于高效液相色谱流动相条件摸索

各位前辈好：
           学生近来做一实验，有诸多不明之处，希望各位前辈帮忙解决一下。
我有一个用甲醇色谱柱提取出来的样品，经过紫外全波段扫描后发现在325nm和291nm处有单峰，但在做高效液相色谱时出峰时间较长，现在要通过改变流动相组成来使出峰时间提前，学生不知从何入手，请各位前辈指点一二。《老师要求用甲醇，乙腈。。。》

[ 本帖最后由 怒吼雄狮 于 2010-10-15 18:55 编辑 ]
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发表于 2010-10-15 23:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大
在做高效液相色谱时出峰时间较长，现在要通过改变流动相组成来使出峰时间提前

请问你现在用的色谱条件是什么？
梯度洗脱还是等度洗脱？梯度的话可以提高起始浓度
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entd_jps[使用道具]
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发表于 2010-10-16 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的样品是用制备液相做出来的么？用C18柱的话将有机相比例调高点不就可以缩短时间了嘛。也可以适当增加柱温，流速
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感悟人生[使用道具]
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发表于 2010-10-16 09:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
“但在做高效液相色谱时出峰时间较长”

啥条件做的？保留时间多少？

增加有机相的比例，增加流速可以缩短保留时间的

相同比例，乙腈水溶液出峰时间比甲醇水溶液短
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yangst85[使用道具]
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发表于 2010-10-16 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用梯度洗脱就可以吧！具体洗脱条件得根据样品的保留，如果想提前的话，在分离度保障的情况下可以提高流动相的极性
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发表于 2010-10-16 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 怒吼雄狮 的帖子

甲醇-水 乙腈-水 先用这两种流动相跑跑 调整比例 看看有没有变化和规律 如果样品已知 根据酸碱性和极性 调整流动相 往里面添加缓冲盐(ph)
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怒吼雄狮[使用道具]
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发表于 2010-10-16 15:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 ttkl533 的帖子

谢谢，我之前只是用甲醇跑的液相，出峰时间在50分钟左右，
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kong0908[使用道具]
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发表于 2010-10-16 20:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
100%甲醇么？试试乙腈。。
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amerigo6[使用道具]
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发表于 2010-10-16 20:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主，考虑一下色谱柱的规格
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gitde[使用道具]
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发表于 2010-10-17 10:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 怒吼雄狮 于 2010-10-16 15:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
谢谢，我之前只是用甲醇跑的液相，出峰时间在50分钟左右，

纯甲醇? 先适当调节甲醇水的比例咯 看看摸摸规律
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