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标题:【求助】单抗药物的糖型分析

北风那个吹[使用道具]
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发表于 2014-8-8 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】单抗药物的糖型分析


有没有做单抗药物糖型分析的同事呢？用NP-HPLC吗？标准品从哪儿里买？GO G0F， G1， G1F
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-8-8 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般是用糖肽酶PNGase F过夜切下来后，沉淀蛋白，上清液收获寡糖，使用HPLC（安捷伦应该就有）分析。看过一份资料，标准品是可以从Prozyme (Hayward,CA, USA)购买。
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hold住[使用道具]
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发表于 2014-8-8 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知各位大侠有没有用液质联用方法分析单抗糖型的呀？盼望交流。。。
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-8-8 13:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

标准品在Sigma有卖的
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-8-8 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

该试验较复杂，收获寡糖后，使用标志物标记（2-AB）,标记后，除去多余的标记物，再进行NP-HPLC,使用荧光检测器进行检测。
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@花开花落@[使用道具]
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发表于 2014-8-8 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果质谱分析的话用标记么？
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@花开花落@[使用道具]
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发表于 2014-8-8 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

目前成熟的LOT-RELEASE的方式是用CE么？似乎在文献中也没什么报到，这似乎是商业机密吧？而HPLC 或者是NP-HPLC 分离不同糖型的能力没有CE好，荧光标记，然后CE分离似乎是一个比较正常的方法吧？
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北风那个吹[使用道具]
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发表于 2014-8-8 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

标品可以从prozyme购买，这家的糖生物块的产品还是蛮齐全的，2-ab的标记试剂盒也有的
做单抗糖型分析 单抗纯化后 用外切糖苷酶PNase切下糖链 用2-ab or 2-aa进行标记，再除去多余的标记，进行HPLC检测
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