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这个吧,我可以大体说一下。你说的嵌套PCR就是指巢式PCR,原理是这样的:指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。 在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。 由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。 步骤相当于多了一组PCR,如果有一旦污染的话,结果会被放大很多倍,所以说一旦污染就是失败了。有点有2个(个人理由)1. 很微量的模板,35循环下很微弱的条带可以尝试;2. 特异性不高的。回收条带做模板。