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标题:【求助】菌落PCR图求助

tudou85[使用道具]
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【求助】菌落PCR图求助

今天做了个大肠杆菌转化子的菌落pcr,结果是主带很明显,大小是对的,但是紧跟着下面拖的很厉害,请问是什么原因呢,有碰到过的吗?另外想问一下,做菌落PCR会出现很多非特异性条带吗?最近也碰到了。。。


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utt0989[使用道具]
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提高一下退火温度,应该可以。另外,菌落PCR会经常出现很多非特异性条带
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feima+[使用道具]
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菌落PCR很多情况下不大准,不能完全信,假阳性有时也挺多
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ladyhuahua[使用道具]
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学习了
你的还好了,我的菌液鉴定还很淡呢
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baidukk[使用道具]
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退火温度
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xue258[使用道具]
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退火温度有影响,这个图要求也没那么高吧,测序正确才行。
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nikonun[使用道具]
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Marker蛮清晰地耶
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luoliqiong[使用道具]
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我不太喜欢做菌落PCR 好像从来都不做 假阳性太多 还是做酶切比较准确
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ladyhuahua[使用道具]
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菌落p做成这样就不错了
有杂带难免的
这个东西就是初步确定一下有优化的必要吗
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