谁知道海棠果多酚氧化酶的测定方法，知道的麻烦回下要具体点。

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楼主，看看这几篇文献也许对你会有所帮助。

小麦多酚氧化酶研究进展
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不同小麦多酚氧化酶活性检测方法的比较
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香蕉中多酚氧化酶活性的测定
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[ 本帖最后由 健康千万家 于 2010-10-26 11:07 编辑 ]

补充一篇文献供参考

植物多酚氧化酶活性测定方法的改进
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　　一、原理与目的

　　多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。

　　PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌，邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成，色素分子量愈高，颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。

　　本实验将采用马铃薯为主要材料，通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。

　　通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关仪器设备的操作使用，以及蛋白质的提取、分离的系统技术。

　　二、材料与试剂

　　(1)马铃薯(大约每小组100-200g)

　　(2)试剂：

　　0.03M 磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001MEDTA，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml;固体硫酸铵;0.03M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001MEDTA，0.005MgCL2)配置时配

　　(3)实验器械与仪器设备：

　　试管与试管架;烧杯、玻璃搅棒;移液管、滴管等;试剂瓶;透析袋;

　　过滤纱布;植物组织匀浆器;pH计和pH试纸;GL-20C高速冷冻离心机;

　　DL-7A大容量低速冷冻离心机

　　三、操作步骤

　　1：粗酶提取：

　　水果肉组织按1：1(W/V)比例与003M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001MEDTA，5%甘油，1%聚乙烯吡咯烷酮)混合，匀浆4层后纱布过滤，滤液以6000rpm离心10min，弃除沉淀获得酶提取液。

　　2：盐析分级沉淀：

　　在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40%饱和度(边加边搅拌达到充分溶解)，然后6000rpm离心20min弃除沉淀;离心上清液在加入固体硫酸铵达到70%饱和度(边加边搅拌达到充分溶解)，再以6000rpm离心20min，弃除上清夜，收集粗酶沉淀。

　　四、实验结果

　　获得PPO粗酶液。

　　实验二十六 植物体内多酚氧化酶活性的测定

　　一、目的

　　通过实验，掌握植物体内多酚氧化酶活性的测定方法。

　　二、原理

　　多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下：

　　多酚氧化酶

　　邻苯二酚(儿茶酚)+1∕2 O2 ——————→ 邻醌 + H2O

　　三、材料、仪器及试剂

　　1. 材料：马铃薯块茎等

　　2. 仪器：UV-1206或UV-1240分光光度计;离心机;恒温水浴;研钵或匀浆机;试管;移液管;纱布袋等。

　　3. 试剂：聚乙烯吡咯烷酮(PVP);0.01mol·L-1 pH 6.5磷酸缓冲液;0.1m mol·L-1pH6.5磷酸缓冲液;0.05 mol·L-1 pH5.5磷酸缓冲液;30%饱和度硫酸铵;0.1 mol·L-1儿茶酚;

　　20%三氯乙酸。

　　四、实验步骤

　　1. 粗酶液的制备

　　称取马铃薯块茎5g于研钵中，加入0.5g 不溶性聚乙烯吡咯烷酮(事先用蒸馏水浸洗，然后过滤以除去杂质)和100ml 0.1mol·L-1pH6.5磷酸缓冲液,磨成匀浆，用几层纱布袋过滤，滤液加入30%饱和度硫酸铵，离心除沉淀，上清液再加硫酸铵使达60%饱和度，离心收集沉淀。将所得沉淀溶于2～3ml 0.01mol·L-1 pH6.5磷酸缓冲液中，即为粗制酶液。

　　2. 活性酶的测定

　　在试管中加入3.9ml 0.05 mol·L-1 pH5.5磷酸缓冲液，1.0ml 0.1 mol·L-1儿茶酚在37℃恒温水浴中保温10min ，然后加入0.5ml酶液(可视酶活性增减用量)，迅速摇匀，倒入比色杯内，于525nm波长处以时间扫描方式，在1～2min内测定吸光度变化(A)值。

　　五、酶活性的计算

　　以每min内A525值变化0.01为1个酶活力单位，按下式计算多酚氧化酶的活力和比活性。

　　A 酶提取液总量(ml)

　　酶活力(0.01A·min-1)=———————×———————————

　　0.01×反应时间 测定时酶液用量(ml)

　　A 酶提取液总量(ml)

　　酶的比活性(0.01A·g-1Fw·min)=—————————×——————————

　　0.01×W×反应时间 测定时酶液用量(ml)

　　公式中：A — 为反应时间内吸光度的变化值;W为样品鲜重(g)。

还有一个PPT，希望那个对楼主有用！

抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定
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