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标题:【求助】培养液中的小黑点

9900[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】培养液中的小黑点


细胞培养若被支原体污染，在显微镜下是啥情况？我现在培养的三种细胞的培养液中均有一个个小黑点（颜色不是很深），真不知道是咋回事？大家养细胞时，有没有对血清进行灭活？
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youreyes[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个问题上次讨论过一些， cuturl('http://www.bioon.net/dispbbs.asp?boardID=89&ID=21525') 有人认为是支原体污染，还有人说是“黑焦虫”我没有查到有关的资料。 我们买的是已经灭过的血清
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发表于 2014-9-1 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
恩恩，
我刚听人说支原体污染是观察不出来的。
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xiaoxiaoniao[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

显微镜又荧光通道就行。
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jingling845[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
小黑点不是污染,若是也只是支原体,根本没有什么黑焦虫,不知他们是怎么想出来的.我用Hoechst33258对有小黑点的细胞进行染色,激光共聚焦荧光显微镜下也没发现支原体污染.我的多种细胞,包括原代培养细胞都有大量黑色颗粒,存在于细胞内和细胞外,细胞生长一点都不受影响.
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mingming0638[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑焦虫我也是在这里听说的，因为我也发现我养的几个细胞系里存在，高倍镜下能明显看出黑点在运动，但是和细菌污染的形态又不一样，也小的多。而在我原代培养的细胞中没有出现，我估计不是血清的问题，因为我原代培养的细胞用的相同的国产胎牛血清。 似乎没法祛除，对生长旺盛的肿瘤细胞影响不大，但对正常体外培养的组织细胞能明显降低存活。 不知道是什么，不过应该不是支原体
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cocacola[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我培养的细胞中也有了小黑点，老师说是细胞的分泌产物。我养的HEP-2细胞是一种分泌细胞。
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 小中大
这种黑色的会动的点又在细胞中出现了，也不一定不影响————在细胞状态好的时候没很大影响，但是细胞状态如果本身就不怎么样，那影响就大一些。 对于CHO细胞出现这种状况当时用的方法是用培养基多次冲洗，情况好一些。 有人推荐用两性霉素不知道效果如何？
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ha111[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑点有大有小，会动 有悬浮有贴壁， 有长在细胞内，也有细胞外的 对细胞还是有较大影响的
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huifeng0516[使用道具]
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发表于 2014-9-1 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

支原体在普通显微镜下根本就看不到，小黑点可能是细胞破裂后的细胞器。
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