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标题:【求助】细胞中的黑点到底怎么回事啊

如影随形[使用道具]
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【求助】细胞中的黑点到底怎么回事啊

我的细胞为什么都出现了小黑点,细胞生长很差。刚复苏出来很好,一传代就完了。请各位大侠指点迷经。我把关于小黑点的帖子全看完了,可是还不知道怎么解决。急啊
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seagate[使用道具]
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2
 

你的是什么细胞啊 我只培养SP20 以前也遇见过 而且小黑点还是动的 应该是被污染了
可以加些饲养细胞复壮
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orangecake[使用道具]
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你是不是在倒置显微镜观察的?小黑点也许是血清中的沉淀物。你的血清怎么处理的啊?是不是经过热灭活了? 通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
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huifeng0516[使用道具]
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好像还没解释清楚啊,我也遇到这样的问题,有时加谷胺酰氨可能有点作用,请有经验者献计献策,带着新手共同成长啊
谢谢
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yueban-1147[使用道具]
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从我的经验来讲,我认为小黑点的组成有以下几种可能:
1。破碎的细胞的细胞核。细胞培养初期,细胞的大量凋亡,会使细胞核裂解出来,形成大量的小黑点。但是小黑点不是细胞凋亡的原因而使结果,一般来说,多数的小黑点不会影响生长。
2。未灭活的血清。血清未灭活,其中的某些成分会呈现小黑点样。未涉及到免疫以及传代方面的实验,一般不推荐灭活,因为灭活会使血清的品质下降。这些小黑点也不会影响细胞生长。
3。上述两个方面的小黑点,在镜下都呈现不动状态,而一旦小黑点呈现出布朗运动,多数情况下,细胞都会迅速大批量的凋亡。在这种情况下,我们考虑是细胞受到污染,这种污染首先应该排除细菌,因为细菌的污染会使培养液变得很浑浊,或者长出白色的丝状物。那么,剩下的我们就考虑是衣原体或支原体感染,有介绍说采用红霉素或卡那霉素可减少小黑点,并取得不错效果。但本人的经历来看,感觉原因还并非那么简单。最近一段时间,本人的细胞也曾因此大量死亡。
总之,除了培养液,我认为操作非常重要,因为这些感染并非持续出现,是不稳定的,个人感觉和一些操作细节有关。
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birdfish[使用道具]
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6
 

这些小黑点,从我们实验室的情况看,是可运动的,且可增殖的。不过是什么,一直不大清楚。去年一位同学在做病毒侵染的细胞电镜实验时,未侵染细胞一切正常,而病毒侵染细胞很快会出现这些小黑点。后来在电镜下,在细胞内看到一些颗粒状的奇怪物质,有类似细胞壁的结构。由此想到了立克次氏体。但立克次氏体是专性细胞寄生的,目前已知只有一种可细胞外生活。这又是一个矛盾。所以它到底是什么,希望大家多提供些线索。
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zwsyrt[使用道具]
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看了上面的分析都有可能,但是这种SP20细胞是半悬浮半贴壁状态,当在显微镜下观察时,由于细胞是半悬浮半贴壁状态影响了视野,当看清楚贴壁的细胞时,这时悬浮在营养液的细胞看到是黑点。

如果这种情况下细胞活力还好!那实验问题应该不是很大!
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glass[使用道具]
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如果这种情况下细胞活力还好!那实验问题应该不是很大!
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toy[使用道具]
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如果是红细胞的话就不足为奇了,那个黑点就是红细胞中间凹陷的暗点
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seagate[使用道具]
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10
 

是白色念珠球菌,低倍镜下呈黑色,高倍镜下呈珠串样,其繁殖不快,但一旦染上了,细胞就呈“颓废”状,哈哈!
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