小中大
从我的经验来讲,我认为小黑点的组成有以下几种可能:
1。破碎的细胞的细胞核。细胞培养初期,细胞的大量凋亡,会使细胞核裂解出来,形成大量的小黑点。但是小黑点不是细胞凋亡的原因而使结果,一般来说,多数的小黑点不会影响生长。
2。未灭活的血清。血清未灭活,其中的某些成分会呈现小黑点样。未涉及到免疫以及传代方面的实验,一般不推荐灭活,因为灭活会使血清的品质下降。这些小黑点也不会影响细胞生长。
3。上述两个方面的小黑点,在镜下都呈现不动状态,而一旦小黑点呈现出布朗运动,多数情况下,细胞都会迅速大批量的凋亡。在这种情况下,我们考虑是细胞受到污染,这种污染首先应该排除细菌,因为细菌的污染会使培养液变得很浑浊,或者长出白色的丝状物。那么,剩下的我们就考虑是衣原体或支原体感染,有介绍说采用红霉素或卡那霉素可减少小黑点,并取得不错效果。但本人的经历来看,感觉原因还并非那么简单。最近一段时间,本人的细胞也曾因此大量死亡。
总之,除了培养液,我认为操作非常重要,因为这些感染并非持续出现,是不稳定的,个人感觉和一些操作细节有关。