小中大【讨论帖】对付贴壁细胞中小沙粒的一种可试性办法
细胞培养做多了,总有一些不如意的事情,有的细胞培养的好好的,过一段时间居然长不动了,在镜下一看,突然增多了不少的沙粒状的东东,有人说可能是细胞的代谢物,总之都不好证实了,我想像这种事情可能有不少人都碰到过吧。我遇到的较多,但经过一些简单的处理之后都还可以,小小经验,介绍一下,先: 其实细胞也很讲究人气的,细胞越多,生长时的状态也就不错,而且细胞较多时,如果培养基太过酸或碱的时候,也能有较大的缓冲或抵抗性,所能一些不好培养的细胞,尽量的保持细胞的密度高一点较好,如果细胞太少,可以进行原瓶消化培养,待长多一点好传新瓶也可以。 言归正传,我说的小经验其实很简单,其实是与正规消化程序差不多。细胞瓶底有较多沙粒时,先往培养瓶里加好消化液后,孵育,待细胞变圆但还贴壁时(这很重要),在镜下可以看到很多小颗粒都已脱落,这时培养瓶竖立在操作台一会儿,再用吸管将流下的液体吸尽,再将细胞置培养箱继续孵育一下,在镜下晃动培养瓶可见细胞已脱落再加入培养液后用吸管轻轻吹打数下后即可继续培养。这样反复培养几次后即可收到效果。(原瓶消化培养也是如此操作) 我试过多种细胞,效果较好,当然也有功力较高的沙粒,本人也期待有高人出招。