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标题:【讨论帖】对付贴壁细胞中小沙粒的一种可试性办法

mimili_901[使用道具]
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【讨论帖】对付贴壁细胞中小沙粒的一种可试性办法


细胞培养做多了,总有一些不如意的事情,有的细胞培养的好好的,过一段时间居然长不动了,在镜下一看,突然增多了不少的沙粒状的东东,有人说可能是细胞的代谢物,总之都不好证实了,我想像这种事情可能有不少人都碰到过吧。我遇到的较多,但经过一些简单的处理之后都还可以,小小经验,介绍一下,先: 其实细胞也很讲究人气的,细胞越多,生长时的状态也就不错,而且细胞较多时,如果培养基太过酸或碱的时候,也能有较大的缓冲或抵抗性,所能一些不好培养的细胞,尽量的保持细胞的密度高一点较好,如果细胞太少,可以进行原瓶消化培养,待长多一点好传新瓶也可以。 言归正传,我说的小经验其实很简单,其实是与正规消化程序差不多。细胞瓶底有较多沙粒时,先往培养瓶里加好消化液后,孵育,待细胞变圆但还贴壁时(这很重要),在镜下可以看到很多小颗粒都已脱落,这时培养瓶竖立在操作台一会儿,再用吸管将流下的液体吸尽,再将细胞置培养箱继续孵育一下,在镜下晃动培养瓶可见细胞已脱落再加入培养液后用吸管轻轻吹打数下后即可继续培养。这样反复培养几次后即可收到效果。(原瓶消化培养也是如此操作) 我试过多种细胞,效果较好,当然也有功力较高的沙粒,本人也期待有高人出招。
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rxcc33[使用道具]
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该小沙砾可能是由于细胞生长环境不善而形成的毒性颗粒。
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mimili_901[使用道具]
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很少有人遇到这种情况吗?

这些沙粒样的东西遇强则弱,细胞状态好,它长的非常慢,基本上不增多,但反之,甚至于将细胞给埋藏!
原来有很多朋友遇到,现在好像没人顶,是不是我的操作不理想?但愿大家有更好的办法发表一下,与大家分享!
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ending[使用道具]
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回复 #3 mimili_901 的帖子

我遇到的。我一般也是传瓶的时候密度高一点,然后就是每天都换液,换液的时候用D-hanks多洗几遍
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fei1226com[使用道具]
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我也遇到,每次消化之前我都用PBS洗三遍,但是还是有。所以我一般都进行离心,自我感觉还是比较好!
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nn255[使用道具]
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这些小沙粒会不会是细胞器?
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wood533[使用道具]
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你说的这种小沙粒会动么? 会不会是大家一直说到的“黑焦虫”呢? 我也遇到过类似的情
况,一般消化时离心一下可以有所改善,但它究竟是什么直到现在也没弄清楚。
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wood533[使用道具]
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不是说是血清热灭活产生的吗?
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redbutterfly[使用道具]
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这个会不会是污染了呢,我们实验室现在有好几种细胞出现这种问题呢
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vvmmoy[使用道具]
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会跟支原体感染有关吗?
因为我用杀支原体的药处理后"小沙粒"就不见了,要处理次数少又会重现!
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