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标题:【求助】支原体污染了细胞

剪刀手520[使用道具]
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【求助】支原体污染了细胞


我的细胞无缘无故就死了很多 也没有染菌迹象 细胞形态也发生了变化 我怀疑是支原体污染了细胞 请问大侠们支原体污染细胞会有什么表现啊 我还不想扔掉细胞 怎么去除污染啊
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misswu61[使用道具]
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Invivogen公司产品精选--支原体的预防、清除和检测

Invivogen公司产品精选--支原体的预防、清除和检测
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。国内外研究表明,在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体污染细胞后,培养液可不发生混浊。多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解,因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢。甚至从培养器皿脱落。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。细胞一旦污染支原体,留之又不可靠,弃之又可惜实在令人头痛,面对得之不易的细胞,研究人员往往很难取舍。 支原体检测试剂盒 支原体检测有人采用PCR的方法,虽然灵敏,但假阳性率高。R&D Systems 公司的MycoProbe支原体检测试剂盒为高通量及日常检测支原体污染提供了方便。这种试剂盒采用标记了碱性磷酸酶的寡核苷酸探针与16S核糖体RNA杂交,随后检测底物证实支原体是否存在。灵敏度可以与PCR方法相媲美,不易出现假阳性的结果,检测时间也仅需要4.5个小时。 支原体污染的预防和清除 Invivogen公司的M-Plasmocin属于新一代杀菌抗生素,能强烈的作用于感染支原体的细胞,杀灭支原体。同时,M-Plasmocin能以一种较低的作用浓度发挥广谱的抗革兰氏阳性和革兰氏阴性的细菌作用,比如能作用于耐青霉素与链霉素的细菌,已经证实M-Plas¬mocin对真核细胞没有毒性。 M-Plasmocin包括两种新的杀菌成份,一种能作用于原核细胞的蛋白系统,另一种能干扰DNA的复制,因为M-Plasmocin能以两种独立的特殊的方式作用靶原核细胞,能完全的去除支原体感染。和其他的抗支原体抗生素比较,M-Plasmocin能同时作用于细胞内与细胞外的,因为M-Plasmocin能有效地杀灭哺乳动物细胞感染的支原体,并不影响细胞本身的代谢,用M-Plas¬mocin处理过的培养细胞,不会重新感染(从其他感染支原体细胞释放的)支原体。实验效果经全球客户数年印证,仅仅只需2周就能清除支原体污染,您也可以在细胞培养液中加入Plasmocin以便保护您珍贵的细胞不受支原体污染的困扰。 1.Normocin™ 能预防支原体,细菌和真菌。 2.Fungin™ 预防和清除真菌。 3.Primocin™ 预防支原体,细菌和真菌:专为原代培养的细胞而设计。 4.Plasmocure™ 是Plasmocin的新一代产品,能在极少数支原体对Plasmocin耐受的情况下发挥作用。 治疗支原体污染:M-Plasmocin使用浓度为25μg/ml作用于感染的培养细胞基两周(1000x稀释)。 预防支原体污染:M-Plasmocin使用浓度为5μg/ml作用于常规的细胞培养基(1000x稀释)。 产品订购指南:
目录号        产品名称
CUL001B        MycoProbe Mycoplasma Detection Kit
rep-pt        PlasmoTest™ (kit)
ant-mpp        Plasmocin™ prophylactic (25 mg)
ant-mpt        Plasmocin™ treatment (50 mg)
ant-pc        Plasmocure™ (100 mg)
ant-nr-1        Normocin™ (500 mg)
ant-fn-1        Fungin™
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ritou1985[使用道具]
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很关心可否用于人感染支原体的治疗。谢谢
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zhy平平[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 ritou1985 于 2014-9-2 17:08 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

很关心可否用于人感染支原体的治疗。谢谢

人不是有抗生素可以使用么?细胞感染支原体我们一般就丢了
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kuaizige[使用道具]
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支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落而且支原体污染后对于一般人而言是在低倍显微镜下是观察不到的,除非有经验的人
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支原体是一种介于细菌和病毒之间,能独立生活的微生物 ,它无细胞壁,形态呈多 形性,最小的直径0 . 2l a m,可通过滤器。支原体污染后 ,因它们无致死细胞毒 性,故可与培养细胞长期共存,培养 液一般 不发生混浊 。轻度污染时,细胞无明显变 化,外观往往给人以 “ 正常”的感觉,实则 细胞受 到多方面的潜在影响,合成,抑制细胞生长;污染较严重时,细胞间隙和细胞内都有大量的黑色小颗粒, 细胞状态明显不好 ,如折光消失,缺乏立体感等2支原体污染的清除 支原体污染细胞后 ,特别是重要细 胞 株,有必要清除支原体。常用的方法有:抗生 素处理法、加温除菌法、动物接种法和与巨噬 细胞共 培养法。加温法是将受支原体污染的 胞置 4 l℃中作用 5 - 1 0 h( 最长可1 8 h )以 杀灭支原体,但 4 1 ℃ 对细胞本身也有较大影响。鉴于此,我们选用新抗生素( P l a s mo c i n )卡 那霉素两种抗支原 体药来解决支原体污染问题。
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支原体污染后,细胞会在培养2天后,培养液迅速发黄!!略混浑。但是看不出太多的颗粒! 另外,用Hoechst 33342染色后,发现细胞表面不光滑,有一些细小细小的荧光点。这就是支原体
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zhenxin[使用道具]
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我们采用PCR的方法检测,灵敏度也很高
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eric930[使用道具]
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支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊,可致细胞增殖缓慢.多数情况下被忽视细微变化也可由于传代、支原体污染在镜下是观察不到的,细胞培养液做培养,等细胞长到60%做支原体银光检测
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ygh2050[使用道具]
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支原体检测求助

各位大侠:

请问楼上有人用过 上海易色医疗科技有限公司的《发光法支原体检测试剂盒》吗?效果怎么样?

我们实验室一直自己设计引物进行支原体PCR的检测,但是总感觉哪里有问题,有时候相同的样品同一实验室不同人的检测结果都不一样。烦死了。

他们公司网站说:PCR检测支原体有可能被细胞代谢产物抑制而导致假阴性,而《发光法支原体检测试剂盒》是通过检测支原体特异性酶的活性,不会产生假阳性和假阴性。我想让他们给个试用装,他们就是不肯给,好小气啊。想直接买,这个试剂盒又不便宜,怕买了效果又不好。急啊

Lonza公司好像也有一款类似的产品,但是每次检测大约需要100元左右,乖乖,用不起啊。

有人帮忙吗???
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