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标题:[未解决]【转载】【求助】关于生物样品制备，利用EM AC20染色的问题

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
a456[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【转载】【求助】关于生物样品制备，利用EM AC20染色的问题

各位大神！小弟做的透射电镜生物样品，利用leica AC20型的自动染色仪来进行染色，效果相当不理想啊。图片本底不清晰，对比不高。请大神指教·！拜谢！！
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小黄[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
没有用过leica AC20，没有接收过生物类的样品，不知道lz的问题这几天有没有找到合适的解决方法

论坛里从事生物样品的TEM研究屈指可数，希望lz能多分享生物样品的制备和观察获得的心得和体会
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a456[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 小黄 的帖子

感谢关注，我也会尽量与大家分享工作心得
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longquan[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主那有EMTP吗？
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发表于 2014-9-11 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 longquan 的帖子

？？请教一下EMTP是什么？
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熊猫[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是这个问题，染色很浅，你的问题解决了吗？
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tomm[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
超薄切片染色浅可能的原因有：
样品锇酸固定不充分；
超薄切片太薄；
染液浓度、染色时间及温度；
样品本身问题，如动物肠上皮等的染色就容易造成灰蒙蒙的，反差低，不同样品采用相同染色步骤可能会有一定差别，我没用过这种染色机器，你可以手动染色一下做个对比啊，希望能有帮助。
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nsdm[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #7 tomm 的帖子

之前去别人的地方学习了下，他们戊二醛，锇酸固定的时间都比我在网上看到的protocol时间长。

他们一直做手动染色，效果还好。
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tomm[使用道具]
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发表于 2014-9-11 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EM AC20我们没用过，我也关注过但是没有米啊，有没有污染？是不是很费染液啊？
染色浅反差低还有和样品固定效果差超微结构保存不好有关，同一个样品再用手工染一次比较一下吧。
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